Nature.com भ्रमण गर्नुभएकोमा धन्यवाद। तपाईंले प्रयोग गरिरहनुभएको ब्राउजरको संस्करणमा सीमित CSS समर्थन छ। उत्कृष्ट परिणामहरूको लागि, हामी तपाईंलाई आफ्नो ब्राउजरको नयाँ संस्करण प्रयोग गर्न सिफारिस गर्छौं (वा इन्टरनेट एक्सप्लोररमा अनुकूलता मोड असक्षम पार्नुहोस्)। यसैबीच, निरन्तर समर्थन सुनिश्चित गर्न, हामी स्टाइलिङ वा जाभास्क्रिप्ट बिना साइट देखाउँदैछौं।
बिरुवाबाट प्राप्त कीटनाशक यौगिकहरूको संयोजनले कीराहरू विरुद्ध सिनर्जिस्टिक वा विरोधी अन्तरक्रिया प्रदर्शन गर्न सक्छ। एडिस लामखुट्टेले सार्ने रोगहरूको द्रुत प्रसार र परम्परागत कीटनाशकहरू प्रति एडिस लामखुट्टेको जनसंख्याको बढ्दो प्रतिरोधलाई ध्यानमा राख्दै, एडिस एजिप्टाईको लार्भा र वयस्क चरणहरू विरुद्ध बिरुवाको आवश्यक तेलहरूमा आधारित टर्पेन यौगिकहरूको अठ्ठाईस संयोजनहरू तयार पारियो र परीक्षण गरियो। पाँचवटा वनस्पति आवश्यक तेलहरू (EOs) लाई सुरुमा तिनीहरूको लार्भानाशक र वयस्क-प्रयोग प्रभावकारिताको लागि मूल्याङ्कन गरिएको थियो, र GC-MS परिणामहरूको आधारमा प्रत्येक EO मा दुई प्रमुख यौगिकहरू पहिचान गरिएको थियो। मुख्य पहिचान गरिएका यौगिकहरू खरिद गरिएका थिए, अर्थात् डायलिल डाइसल्फाइड, डायलिल ट्रिसल्फाइड, कार्भोन, लिमोनेन, युजेनोल, मिथाइल युजेनोल, युकेलिप्टोल, युडेस्मोल र लामखुट्टे अल्फा-पाइनेन। त्यसपछि यी यौगिकहरूको बाइनरी संयोजनहरू सबलेथल खुराकहरू प्रयोग गरेर तयार पारियो र तिनीहरूको सिनर्जिस्टिक र विरोधी प्रभावहरू परीक्षण र निर्धारण गरियो। सबैभन्दा राम्रो लार्भिसाइडल कम्पोजिसनहरू लिमोनिनलाई डायलिल डाइसल्फाइडसँग मिसाएर प्राप्त गरिन्छ, र सबैभन्दा राम्रो वयस्क कम्पोजिसनहरू कार्भोनलाई लिमोनिनसँग मिसाएर प्राप्त गरिन्छ। व्यावसायिक रूपमा प्रयोग हुने सिंथेटिक लार्भिसाइड टेम्फोस र वयस्क औषधि मालाथियनलाई छुट्टाछुट्टै र टेर्पेनोइडहरूसँग बाइनरी संयोजनमा परीक्षण गरिएको थियो। नतिजाहरूले देखाए कि टेमेफोस र डायलिल डाइसल्फाइड र मालाथियन र युडेस्मोलको संयोजन सबैभन्दा प्रभावकारी संयोजन थियो। यी शक्तिशाली संयोजनहरूले एडिस एजिप्टी विरुद्ध प्रयोगको सम्भावना राख्छन्।
वनस्पति आवश्यक तेलहरू (EOs) विभिन्न जैविक सक्रिय यौगिकहरू भएका माध्यमिक मेटाबोलाइटहरू हुन् र कृत्रिम कीटनाशकहरूको विकल्पको रूपमा बढ्दो रूपमा महत्त्वपूर्ण हुँदै गइरहेका छन्। तिनीहरू वातावरणमैत्री र प्रयोगकर्ता-मैत्री मात्र होइनन्, तर तिनीहरू विभिन्न जैविक सक्रिय यौगिकहरूको मिश्रण पनि हुन्, जसले औषधि प्रतिरोध विकास गर्ने सम्भावनालाई पनि कम गर्छ। GC-MS प्रविधि प्रयोग गरेर, अनुसन्धानकर्ताहरूले विभिन्न वनस्पति आवश्यक तेलहरूको घटकहरूको जाँच गरे र १७,५०० सुगन्धित बिरुवाहरूबाट ३,००० भन्दा बढी यौगिकहरू पहिचान गरे, जसमध्ये धेरैजसो कीटनाशक गुणहरूको लागि परीक्षण गरिएको थियो र कीटनाशक प्रभावहरू भएको रिपोर्ट गरिएको छ ३,४। केही अध्ययनहरूले हाइलाइट गर्छन् कि यौगिकको मुख्य घटकको विषाक्तता यसको कच्चा इथिलीन अक्साइडको जस्तै वा त्यो भन्दा बढी छ। तर व्यक्तिगत यौगिकहरूको प्रयोगले फेरि प्रतिरोधको विकासको लागि ठाउँ छोड्न सक्छ, जस्तै रासायनिक कीटनाशकहरूको मामलामा ५,६। त्यसकारण, हालको ध्यान कीटनाशक प्रभावकारिता सुधार गर्न र लक्षित कीट जनसंख्यामा प्रतिरोधको सम्भावना कम गर्न इथिलीन अक्साइड-आधारित यौगिकहरूको मिश्रण तयार गर्ने कुरामा छ। EOs मा उपस्थित व्यक्तिगत सक्रिय यौगिकहरूले EO को समग्र गतिविधिलाई प्रतिबिम्बित गर्ने संयोजनहरूमा सिनर्जिस्टिक वा विरोधी प्रभावहरू प्रदर्शन गर्न सक्छन्, जुन तथ्यलाई अघिल्ला अनुसन्धानकर्ताहरू द्वारा गरिएको अध्ययनहरूमा राम्रोसँग जोड दिइएको छ7,8। भेक्टर नियन्त्रण कार्यक्रममा EO र यसका घटकहरू पनि समावेश छन्। आवश्यक तेलहरूको लामखुट्टेनाशक गतिविधि क्युलेक्स र एनोफिलिस लामखुट्टेमा व्यापक रूपमा अध्ययन गरिएको छ। धेरै अध्ययनहरूले समग्र विषाक्तता बढाउन र साइड इफेक्टहरू कम गर्न व्यावसायिक रूपमा प्रयोग हुने कृत्रिम कीटनाशकहरूसँग विभिन्न बोटबिरुवाहरू संयोजन गरेर प्रभावकारी कीटनाशकहरू विकास गर्ने प्रयास गरेका छन्। तर एडिस एजिप्टी विरुद्ध यस्ता यौगिकहरूको अध्ययन दुर्लभ रहन्छ। चिकित्सा विज्ञानमा भएको प्रगति र औषधि र खोपहरूको विकासले केही भेक्टर-जनित रोगहरूसँग लड्न मद्दत गरेको छ। तर एडिस एजिप्टी लामखुट्टेद्वारा प्रसारित भाइरसको विभिन्न सेरोटाइपहरूको उपस्थितिले खोप कार्यक्रमहरू असफल भएको छ। त्यसकारण, जब यस्ता रोगहरू हुन्छन्, भेक्टर नियन्त्रण कार्यक्रमहरू रोगको फैलावट रोक्नको लागि एक मात्र विकल्प हुन्। हालको परिदृश्यमा, एडिस एजिप्टीको नियन्त्रण धेरै महत्त्वपूर्ण छ किनकि यो विभिन्न भाइरसहरू र तिनीहरूका सेरोटाइपहरूको प्रमुख भेक्टर हो जसले डेंगु ज्वरो, जिका, डेंगु हेमोरेजिक ज्वरो, पहेंलो ज्वरो, आदि निम्त्याउँछ। सबैभन्दा उल्लेखनीय कुरा यो हो कि लगभग सबै भेक्टर-जनित एडिस-जनित रोगहरूको संख्या इजिप्टमा हरेक वर्ष बढ्दै गएको छ र विश्वव्यापी रूपमा बढ्दै गएको छ। त्यसैले, यस सन्दर्भमा, एडिस एजिप्टी जनसंख्याको लागि वातावरणमैत्री र प्रभावकारी नियन्त्रण उपायहरू विकास गर्न तत्काल आवश्यकता छ। यस सन्दर्भमा सम्भावित उम्मेदवारहरू EOs, तिनीहरूका घटक यौगिकहरू, र तिनीहरूका संयोजनहरू हुन्। त्यसकारण, यस अध्ययनले एडिस एजिप्टी विरुद्ध कीटनाशक गुणहरू भएका पाँच बोटबिरुवाहरू (जस्तै, पुदिना, पवित्र तुलसी, युकेलिप्टस स्पटेड, एलियम सल्फर र मेलालुका) बाट प्रमुख बिरुवा EO यौगिकहरूको प्रभावकारी समन्वयात्मक संयोजनहरू पहिचान गर्ने प्रयास गरेको छ।
सबै चयन गरिएका EO हरूले ०.४२ देखि १६३.६५ ppm सम्मको २४-घण्टा LC50 सहित एडिस एजिप्टाई विरुद्ध सम्भावित लार्भिसिडल गतिविधि प्रदर्शन गरे। २४ घण्टामा ०.४२ ppm को LC50 मानको साथ पेपरमिन्ट (Mp) EO को लागि उच्चतम लार्भिसिडल गतिविधि रेकर्ड गरिएको थियो, त्यसपछि २४ घण्टामा १६.१९ ppm को LC50 मानको साथ लसुन (As) रेकर्ड गरिएको थियो (तालिका १)।
Ocimum Saintum, Os EO बाहेक, अन्य सबै चार स्क्रिन गरिएका EO हरूले स्पष्ट एलर्जी प्रभावहरू देखाए, जसमा LC50 मानहरू 24-घण्टा एक्सपोजर अवधिमा 23.37 देखि 120.16 ppm सम्म थिए। Thymophilus striata (Cl) EO एक्सपोजरको 24 घण्टा भित्र 23.37 ppm को LC50 मान भएका वयस्कहरूलाई मार्न सबैभन्दा प्रभावकारी थियो, त्यसपछि Eucalyptus maculata (Em) थियो जसको LC50 मान 101.91 ppm थियो (तालिका 1)। अर्कोतर्फ, Os को लागि LC50 मान अझै निर्धारण गरिएको छैन किनकि उच्चतम खुराकमा 53% को उच्चतम मृत्यु दर रेकर्ड गरिएको थियो (पूरक चित्र 3)।
प्रत्येक EO मा दुई प्रमुख घटक यौगिकहरू NIST पुस्तकालय डाटाबेस परिणामहरू, GC क्रोमेटोग्राम क्षेत्र प्रतिशत, र MS स्पेक्ट्रा परिणामहरू (तालिका २) को आधारमा पहिचान र चयन गरिएको थियो। EO As को लागि, पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइड थिए; EO Mp को लागि पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू कार्भोन र लिमोनेन थिए, EO Em को लागि पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू युडेस्मोल र युकेलिप्टोल थिए; EO Os को लागि, पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू युजेनोल र मिथाइल युजेनोल थिए, र EO Cl को लागि, पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू युजेनोल र α-पाइनेन थिए (चित्र १, पूरक चित्र ५-८, पूरक तालिका १-५)।
चयन गरिएका आवश्यक तेलहरू (ए-डायलिल डाइसल्फाइड; बी-डायलिल ट्रिसल्फाइड; सी-युजेनोल; डी-मिथाइल युजेनोल; ई-लिमोनेन; एफ-एरोमेटिक सेपेरोन; जी-α-पिनेन; एच-सिनोल; आर-युडामोल) को मुख्य टेरपेनोइड्सको मास स्पेक्ट्रोमेट्रीको नतिजा।
कुल नौ यौगिकहरू (डायलिल डाइसल्फाइड, डायलिल ट्रिसल्फाइड, युजेनोल, मिथाइल युजेनोल, कार्भोन, लिमोनेन, युकेलिप्टोल, युडेस्मोल, α-पाइनेन) प्रभावकारी यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरिएको थियो जुन EO का मुख्य घटक हुन् र लार्भा चरणहरूमा एडिस एजिप्टी विरुद्ध व्यक्तिगत रूपमा जैव परीक्षण गरिएको थियो। २४ घण्टाको सम्पर्क पछि युडेस्मोलको LC50 मान २.२५ पीपीएमको साथ सबैभन्दा बढी लार्भिसिडल गतिविधि थियो। डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइड यौगिकहरूमा पनि सम्भावित लार्भिसिडल प्रभावहरू पाइएको छ, जसको औसत सबलेथल खुराक १०-२० पीपीएमको दायरामा छ। ६३.३५ पीपीएम, १३९.२९ पीपीएमको LC50 मान भएका युजेनोल, लिमोनेन र युकेलिप्टोल यौगिकहरूको लागि मध्यम लार्भिसिडल गतिविधि फेरि अवलोकन गरिएको थियो। र २४ घण्टा पछि क्रमशः १८१.३३ पीपीएम (तालिका ३)। यद्यपि, उच्चतम मात्रामा पनि मिथाइल युजेनोल र कार्भोनको कुनै महत्त्वपूर्ण लार्भिसिडल क्षमता फेला परेन, त्यसैले LC50 मानहरू गणना गरिएन (तालिका ३)। सिंथेटिक लार्भिसिडल टेमेफोसको २४ घण्टाको एक्सपोजरमा एडिस एजिप्टी विरुद्ध ०.४३ पीपीएमको औसत घातक सांद्रता थियो (तालिका ३, पूरक तालिका ६)।
सात यौगिकहरू (डायलिल डाइसल्फाइड, डायलिल ट्रिसल्फाइड, युकेलिप्टोल, α-पाइनिन, युडेस्मोल, लिमोनिन र कार्भोन) प्रभावकारी EO को मुख्य यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरिएको थियो र वयस्क इजिप्टियन एडिस लामखुट्टे विरुद्ध व्यक्तिगत रूपमा परीक्षण गरिएको थियो। प्रोबिट रिग्रेसन विश्लेषण अनुसार, युडेस्मोलमा LC50 मान १.८२ पीपीएमको साथ उच्चतम क्षमता भएको पाइयो, त्यसपछि २४-घण्टा एक्सपोजर समयमा युकेलिप्टोलमा LC50 मान १७.६० पीपीएमको साथ। परीक्षण गरिएका बाँकी पाँच यौगिकहरू १४०.७९ देखि ७३७.०१ पीपीएम (तालिका ३) सम्मको LC50 भएका वयस्कहरूका लागि मध्यम हानिकारक थिए। सिंथेटिक अर्गानोफोस्फोरस म्यालाथियन युडेस्मोल भन्दा कम शक्तिशाली र अन्य छ यौगिकहरू भन्दा उच्च थियो, २४-घण्टा एक्सपोजर अवधिमा LC50 मान ५.४४ पीपीएमको साथ (तालिका ३, पूरक तालिका ६)।
सात शक्तिशाली सिसा यौगिकहरू र अर्गानोफोस्फोरस टेमफोसेटलाई १:१ अनुपातमा तिनीहरूको LC50 खुराकहरूको बाइनरी संयोजनहरू तयार गर्न चयन गरिएको थियो। एडिस एजिप्टी विरुद्ध तिनीहरूको लार्भिसिडल प्रभावकारिताको लागि कुल २८ बाइनरी संयोजनहरू तयार पारिएको थियो र परीक्षण गरिएको थियो। नौ संयोजनहरू सिनर्जिस्टिक भएको पाइयो, १४ संयोजनहरू विरोधी थिए, र पाँच संयोजनहरू लार्भिसिडल थिएनन्। सिनर्जिस्टिक संयोजनहरू मध्ये, डायलिल डाइसल्फाइड र टेमोफोलको संयोजन सबैभन्दा प्रभावकारी थियो, २४ घण्टा पछि १००% मृत्युदर अवलोकन गरिएको थियो (तालिका ४)। त्यस्तै गरी, डायलिल डाइसल्फाइड र युजेनोलसँग लिमोनेनको मिश्रणले ९८.३% को अवलोकन गरिएको लार्भिसिडल मृत्युदरको साथ राम्रो क्षमता देखायो (तालिका ५)। बाँकी ४ संयोजनहरू, जस्तै युडेस्मोल प्लस युकेलिप्टोल, युडेस्मोल प्लस लिमोनेन, युकेलिप्टोल प्लस अल्फा-पाइनेन, अल्फा-पाइनेन प्लस टेमेफोस, ले पनि उल्लेखनीय लार्भिसिडल प्रभावकारिता देखायो, जसमा मृत्युदर ९०% भन्दा बढी देखिएको थियो। अपेक्षित मृत्युदर ६०-७५% को नजिक छ। (तालिका ४)। यद्यपि, α-पाइनेन वा युकेलिप्टससँग लिमोनेनको संयोजनले विरोधी प्रतिक्रियाहरू देखायो। त्यस्तै गरी, युजेनोल वा युकेलिप्टस वा युडेस्मोल वा डायलिल ट्रिसल्फाइडसँग टेमेफोसको मिश्रणमा विरोधी प्रभावहरू पाइएको छ। त्यस्तै गरी, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइडको संयोजन र युडेस्मोल वा युजेनोलसँग यी यौगिकहरू मध्ये कुनै एकको संयोजन तिनीहरूको लार्भिसिडल कार्यमा विरोधी छन्। युजेनोल वा α-पाइनेनसँग युडेस्मोलको संयोजनसँग पनि विरोधीता रिपोर्ट गरिएको छ।
वयस्क अम्लीय गतिविधिको लागि परीक्षण गरिएका सबै २८ बाइनरी मिश्रणहरू मध्ये, ७ संयोजनहरू सिनर्जिस्टिक थिए, ६ वटामा कुनै प्रभाव थिएन, र १५ विरोधी थिए। युकलिप्टससँग युडेसमोल र कार्भोनसँग लिमोनेनको मिश्रण अन्य सिनर्जिस्टिक संयोजनहरू भन्दा बढी प्रभावकारी पाइयो, मृत्युदर २४ घण्टामा क्रमशः ७६% र १००% थियो (तालिका ५)। म्यालाथियनले लिमोनेन र डायलिल ट्रिसल्फाइड बाहेक सबै यौगिकहरूको संयोजनहरूसँग सिनर्जिस्टिक प्रभाव प्रदर्शन गरेको अवलोकन गरिएको छ। अर्कोतर्फ, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइड र युकलिप्टस, वा युकलिप्टोल, वा कार्भोन, वा लिमोनेनसँग ती मध्ये कुनै एकको संयोजन बीच शत्रुता फेला परेको छ। त्यस्तै गरी, युडेसमोल वा लिमोनेनसँग α-पिनेन, कार्भोन वा लिमोनेनसँग युकलिप्टोल, र युडेसमोल वा म्यालाथियनसँग लिमोनेनको संयोजनले विरोधी लार्भिसिडल प्रभावहरू देखायो। बाँकी छ वटा संयोजनहरूको लागि, अपेक्षित र अवलोकन गरिएको मृत्युदर बीच कुनै महत्त्वपूर्ण भिन्नता थिएन (तालिका ५)।
सिनर्जिस्टिक प्रभाव र सबलेथल डोजको आधारमा, ठूलो संख्यामा एडिस एजिप्टाई लामखुट्टे विरुद्ध तिनीहरूको लार्भिसिडल विषाक्तता अन्ततः चयन गरिएको थियो र थप परीक्षण गरिएको थियो। नतिजाहरूले देखाए कि बाइनरी संयोजनहरू युजेनोल-लिमोनेन, डायलिल डाइसल्फाइड-लिमोनेन र डायलिल डाइसल्फाइड-टाइमफोस प्रयोग गरेर अवलोकन गरिएको लार्भिसिडल मृत्युदर १००% थियो, जबकि अपेक्षित लार्भिसिडल मृत्युदर क्रमशः ७६.४८%, ७२.१६% र ६३.४% थियो (तालिका ६)। । लिमोनेन र युडेस्मोलको संयोजन तुलनात्मक रूपमा कम प्रभावकारी थियो, २४-घण्टा एक्सपोजर अवधिमा ८८% लार्भिसिडल मृत्युदर अवलोकन गरिएको थियो (तालिका ६)। संक्षेपमा, चार चयन गरिएका बाइनरी संयोजनहरूले ठूलो मात्रामा लागू गर्दा एडिस एजिप्टाई विरुद्ध सिनर्जिस्टिक लार्भिसिडल प्रभावहरू पनि प्रदर्शन गरे (तालिका ६)।
वयस्क एडिस एजिप्टाईको ठूलो जनसंख्या नियन्त्रण गर्न एडल्टोसाइडल बायोएसेका लागि तीन सिनर्जिस्टिक संयोजनहरू चयन गरिएको थियो। ठूला कीराहरूको उपनिवेशहरूमा परीक्षण गर्न संयोजनहरू चयन गर्न, हामीले पहिले दुई उत्कृष्ट सिनर्जिस्टिक टेर्पेन संयोजनहरूमा ध्यान केन्द्रित गर्यौं, अर्थात् कार्भोन प्लस लिमोनेन र युकेलिप्टोल प्लस युडेस्मोल। दोस्रो, सिंथेटिक अर्गानोफोस्फेट म्यालाथियन र टेरपेनोइडहरूको संयोजनबाट उत्तम सिनर्जिस्टिक संयोजन चयन गरिएको थियो। हामी विश्वास गर्छौं कि म्यालाथियन र युडेस्मोलको संयोजन ठूला कीराहरूको उपनिवेशहरूमा परीक्षणको लागि उत्तम संयोजन हो किनभने उच्चतम अवलोकन गरिएको मृत्युदर र उम्मेदवार सामग्रीहरूको धेरै कम LC50 मानहरू छन्। म्यालाथियनले α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptus, carvone र eudesmol सँग संयोजनमा सिनर्जिज्म प्रदर्शन गर्दछ। तर यदि हामीले LC50 मानहरू हेर्छौं भने, युडेस्मोलको सबैभन्दा कम मान (2.25 ppm) छ। मालाथियन, α-पाइनिन, डायलिल डाइसल्फाइड, युकेलिप्टोल र कार्भोनको गणना गरिएको LC50 मानहरू क्रमशः ५.४, ७१६.५५, १६६.०२, १७.६ र १४०.७९ पीपीएम थिए। यी मानहरूले संकेत गर्दछ कि मालाथियन र युडेस्मोलको संयोजन खुराकको हिसाबले इष्टतम संयोजन हो। नतिजाहरूले देखाए कि कार्भोन प्लस लिमोनेन र युडेस्मोल प्लस म्यालाथियनको संयोजनमा १००% मृत्युदर देखिएको थियो जबकि अपेक्षित मृत्युदर ६१% देखि ६५% थियो। अर्को संयोजन, युडेस्मोल प्लस युकेलिप्टोलले २४ घण्टाको जोखिम पछि ७८.६६% मृत्युदर देखायो, अपेक्षित मृत्युदर ६०% थियो। तीनै चयन गरिएका संयोजनहरूले वयस्क एडिस एजिप्टी विरुद्ध ठूलो मात्रामा लागू गर्दा पनि सिनर्जिस्टिक प्रभावहरू प्रदर्शन गरे (तालिका ६)।
यस अध्ययनमा, Mp, As, Os, Em र Cl जस्ता चयन गरिएका बिरुवा EOs ले Aedes aegypti को लार्भा र वयस्क चरणहरूमा आशाजनक घातक प्रभावहरू देखाए। Mp EO मा 0.42 ppm को LC50 मानको साथ उच्चतम लार्भानाशक गतिविधि थियो, त्यसपछि As, Os र Em EOs मा 24 घण्टा पछि 50 ppm भन्दा कम LC50 मानको साथ आउँछ। यी नतिजाहरू लार्भानाशक र अन्य डिप्टेरस झिंगाहरूको अघिल्लो अध्ययनहरूसँग मेल खान्छ10,11,12,13,14। यद्यपि Cl को लार्भानाशक क्षमता अन्य आवश्यक तेलहरू भन्दा कम छ, 24 घण्टा पछि LC50 मान 163.65 ppm को साथ, यसको वयस्क क्षमता 24 घण्टा पछि LC50 मान 23.37 ppm को साथ उच्चतम छ। Mp, As र Em EOs ले पनि २४ घण्टाको एक्सपोजरमा १००-१२० ppm को दायरामा LC50 मानहरू सहित राम्रो एलर्जीनाशक क्षमता देखाए, तर तिनीहरूको लार्भिसिडल प्रभावकारिता भन्दा तुलनात्मक रूपमा कम थिए। अर्कोतर्फ, EO Os ले उच्चतम चिकित्सीय खुराकमा पनि नगण्य एलर्जीनाशक प्रभाव प्रदर्शन गर्यो। यसरी, परिणामहरूले संकेत गर्दछ कि बोटबिरुवाहरूमा इथिलीन अक्साइडको विषाक्तता लामखुट्टेको विकास चरणमा निर्भर गर्दछ। यो कीराको शरीरमा EOs को प्रवेश दर, विशिष्ट लक्ष्य इन्जाइमहरूसँगको तिनीहरूको अन्तरक्रिया, र प्रत्येक विकास चरणमा लामखुट्टेको डिटोक्सिफिकेसन क्षमतामा पनि निर्भर गर्दछ। ठूलो संख्यामा अध्ययनहरूले देखाएको छ कि मुख्य घटक यौगिक इथिलीन अक्साइडको जैविक गतिविधिमा एक महत्त्वपूर्ण कारक हो, किनकि यसले कुल यौगिकहरूको बहुमतको लागि खाता बनाउँछ3,12,17,18। त्यसकारण, हामीले प्रत्येक EO मा दुई मुख्य यौगिकहरू विचार गर्यौं। GC-MS नतिजाहरूको आधारमा, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइडलाई EO As को प्रमुख यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरिएको थियो, जुन अघिल्लो रिपोर्टहरूसँग मिल्दोजुल्दो छ19,20,21। यद्यपि अघिल्ला रिपोर्टहरूले मेन्थोल यसको मुख्य यौगिकहरू मध्ये एक थियो भनेर संकेत गरे पनि, कार्भोन र लिमोनेनलाई फेरि Mp EO22,23 को मुख्य यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरिएको थियो। Os EO को संरचना प्रोफाइलले देखायो कि युजेनोल र मिथाइल युजेनोल मुख्य यौगिकहरू हुन्, जुन पहिलेका अनुसन्धानकर्ताहरूको निष्कर्षसँग मिल्दोजुल्दो छ16,24। Eucalyptol र eucalyptol लाई Em पातको तेलमा उपस्थित मुख्य यौगिकहरूको रूपमा रिपोर्ट गरिएको छ, जुन केही अनुसन्धानकर्ताहरूको निष्कर्षसँग मिल्दोजुल्दो छ25,26 तर Olalade et al.27 को निष्कर्षको विपरीत। मेलालुका आवश्यक तेलमा सिनेओल र α-पाइनेनको प्रभुत्व अवलोकन गरिएको थियो, जुन अघिल्लो अध्ययनहरू जस्तै छ28,29। विभिन्न स्थानहरूमा एउटै बिरुवा प्रजातिबाट निकालिएका आवश्यक तेलहरूको संरचना र सांद्रतामा अन्तरविशिष्ट भिन्नताहरू रिपोर्ट गरिएको छ र यो अध्ययनमा पनि अवलोकन गरिएको छ, जुन भौगोलिक बिरुवाको वृद्धि अवस्था, फसल काट्ने समय, विकास चरण, वा बिरुवाको उमेरबाट प्रभावित हुन्छ। केमोटाइपहरूको उपस्थिति, आदि।२२,३०,३१,३२। त्यसपछि प्रमुख पहिचान गरिएका यौगिकहरू खरिद गरियो र तिनीहरूको लार्भिसिडल प्रभाव र वयस्क एडिस एजिप्टी लामखुट्टेमा प्रभावहरूको लागि परीक्षण गरियो। नतिजाहरूले देखाए कि डायलिल डाइसल्फाइडको लार्भिसिडल गतिविधि कच्चा EO As को तुलनात्मक थियो। तर डायलिल ट्रिसल्फाइडको गतिविधि EO As भन्दा बढी छ। यी परिणामहरू क्युलेक्स फिलिपिन्समा किम्बारिस एट अल द्वारा प्राप्त गरिएका जस्तै छन्। यद्यपि, यी दुई यौगिकहरूले लक्षित लामखुट्टेहरू विरुद्ध राम्रो स्वचालित गतिविधि देखाएका छैनन्, जुन टेनेब्रिओ मोलिटरमा प्लाटा-रुएडा एट अल ३४ को नतिजाहरूसँग मेल खान्छ। Os EO एडिस एजिप्टीको लार्भिसिडल चरण विरुद्ध प्रभावकारी छ, तर वयस्क चरण विरुद्ध होइन। यो स्थापित भएको छ कि मुख्य व्यक्तिगत यौगिकहरूको लार्भिसिडल गतिविधि कच्चा Os EO भन्दा कम छ। यसले अन्य यौगिकहरूको लागि भूमिका र कच्चा इथिलीन अक्साइडमा तिनीहरूको अन्तरक्रियालाई जनाउँछ। मिथाइल युजेनोलमा मात्र नगण्य गतिविधि हुन्छ, जबकि युजेनोलमा मात्र मध्यम लार्भिसिडल गतिविधि हुन्छ। यो निष्कर्षले एकातिर, 35,36 पुष्टि गर्छ, र अर्कोतर्फ, पहिलेका अनुसन्धानकर्ताहरूको निष्कर्षको विरोध गर्दछ37,38। युजेनोल र मिथाइल्युजेनोलको कार्यात्मक समूहहरूमा भिन्नताले एउटै लक्षित कीरामा फरक विषाक्तता निम्त्याउन सक्छ39। लिमोनेनमा मध्यम लार्भिसिडल गतिविधि भएको पाइयो, जबकि कार्भोनको प्रभाव नगण्य थियो। त्यस्तै गरी, वयस्क कीराहरूमा लिमोनेनको अपेक्षाकृत कम विषाक्तता र कार्भोनको उच्च विषाक्तताले केही अघिल्ला अध्ययनहरूको नतिजालाई समर्थन गर्दछ40 तर अरूको विरोध गर्दछ41। इन्ट्रासाइक्लिक र एक्सोसाइक्लिक दुवै स्थितिमा दोहोरो बन्धनको उपस्थितिले लार्भिसाइड्स ३,४१ को रूपमा यी यौगिकहरूको फाइदा बढाउन सक्छ, जबकि कार्भोन, जुन असंतृप्त अल्फा र बीटा कार्बन भएको केटोन हो, वयस्कहरूमा विषाक्तताको लागि उच्च सम्भावना प्रदर्शन गर्न सक्छ ४२। यद्यपि, लिमोनेन र कार्भोनको व्यक्तिगत विशेषताहरू कुल EO Mp भन्दा धेरै कम छन् (तालिका १, तालिका ३)। परीक्षण गरिएका टेरपेनोइडहरू मध्ये, युडेसमोलमा २.५ पीपीएम भन्दा कम LC50 मानको साथ सबैभन्दा ठूलो लार्भिसाइडल र वयस्क गतिविधि भएको पाइयो, जसले यसलाई एडिस लामखुट्टेको नियन्त्रणको लागि एक आशाजनक यौगिक बनायो। यसको प्रदर्शन सम्पूर्ण EO Em भन्दा राम्रो छ, यद्यपि यो चेङ एट अल.४० को निष्कर्षहरूसँग मेल खाँदैन। युडेसमोल दुई आइसोप्रीन एकाइहरू भएको सेस्क्विटरपीन हो जुन युकलिप्टस जस्ता अक्सिजनयुक्त मोनोटर्पेनहरू भन्दा कम अस्थिर छ र त्यसैले कीटनाशकको रूपमा बढी क्षमता छ। युकेलिप्टोलमा लार्भिसिडल भन्दा वयस्क गतिविधि बढी हुन्छ, र पहिलेका अध्ययनहरूका नतिजाहरूले यसलाई समर्थन र खण्डन दुवै गर्छन्37,43,44। यो गतिविधि एक्लै सम्पूर्ण EO Cl सँग लगभग तुलनात्मक छ। अर्को साइकल चलाउने मोनोटेर्पेन, α-pinene, ले लार्भिसिडल प्रभाव भन्दा एडिस एजिप्टीमा वयस्क प्रभाव कम गर्छ, जुन पूर्ण EO Cl को प्रभावको विपरीत हो। टेरपेनोइड्सको समग्र कीटनाशक गतिविधि तिनीहरूको लिपोफिलिसिटी, अस्थिरता, कार्बन शाखा, प्रक्षेपण क्षेत्र, सतह क्षेत्र, कार्यात्मक समूहहरू र तिनीहरूको स्थितिहरूबाट प्रभावित हुन्छ45,46। यी यौगिकहरूले कोशिका संचयहरू नष्ट गरेर, श्वासप्रश्वास गतिविधिलाई अवरुद्ध गरेर, स्नायु आवेगहरूको प्रसारणमा बाधा पुर्याएर, आदि कार्य गर्न सक्छन्। 47 सिंथेटिक अर्गानोफोस्फेट टेमेफोसमा 0.43 ppm को LC50 मानको साथ उच्चतम लार्भिसिडल गतिविधि भएको पाइयो, जुन लेकको डेटा -Utala48 सँग मेल खान्छ। सिंथेटिक अर्गानोफोस्फोरस म्यालाथियनको वयस्क गतिविधि ५.४४ पीपीएममा रिपोर्ट गरिएको थियो। यद्यपि यी दुई अर्गानोफोस्फेटहरूले एडिस एजिप्टाईको प्रयोगशाला स्ट्रेनहरू विरुद्ध अनुकूल प्रतिक्रिया देखाएका छन्, विश्वका विभिन्न भागहरूमा यी यौगिकहरू विरुद्ध लामखुट्टेको प्रतिरोध रिपोर्ट गरिएको छ ४९। यद्यपि, हर्बल औषधिहरूको प्रतिरोध विकासको कुनै समान रिपोर्टहरू फेला परेका छैनन् ५०। यसरी, भेक्टर नियन्त्रण कार्यक्रमहरूमा वनस्पतिहरूलाई रासायनिक कीटनाशकहरूको सम्भावित विकल्पको रूपमा मानिन्छ।
थाइमेटफोसको साथ शक्तिशाली टेरपेनोइड्स र टेरपेनोइड्सबाट तयार पारिएका २८ बाइनरी संयोजनहरू (१:१) मा लार्भिसिडल प्रभाव परीक्षण गरिएको थियो, र ९ संयोजनहरू सिनर्जिस्टिक, १४ विरोधी र ५ विरोधी पाइयो। कुनै प्रभाव परेन। अर्कोतर्फ, वयस्क क्षमता बायोएसेमा, ७ संयोजनहरू सिनर्जिस्टिक, १५ संयोजनहरू विरोधी थिए, र ६ संयोजनहरूले कुनै प्रभाव नपरेको रिपोर्ट गरिएको थियो। केही संयोजनहरूले सिनर्जिस्टिक प्रभाव उत्पादन गर्नुको कारण विभिन्न महत्त्वपूर्ण मार्गहरूमा एकैसाथ अन्तरक्रिया गर्ने उम्मेदवार यौगिकहरू, वा विशेष जैविक मार्गको विभिन्न प्रमुख इन्जाइमहरूको क्रमिक अवरोधको कारण हुन सक्छ। डायलिल डाइसल्फाइड, युकलिप्टस वा युजेनोलसँग लिमोनिनको संयोजन साना र ठूला दुवै स्तरका अनुप्रयोगहरूमा सिनर्जिस्टिक पाइयो (तालिका ६), जबकि युकलिप्टस वा α-पाइनेनसँग यसको संयोजनले लार्भामा विरोधी प्रभाव पारेको पाइयो। औसतमा, लिमोनिन राम्रो सिनर्जिस्ट देखिन्छ, सम्भवतः मिथाइल समूहहरूको उपस्थिति, स्ट्र्याटम कोर्नियममा राम्रो प्रवेश, र कार्यको फरक संयन्त्रको कारणले गर्दा52,53। यो पहिले रिपोर्ट गरिएको छ कि लिमोनिनले कीराको छाला (सम्पर्क विषाक्तता) मा प्रवेश गरेर, पाचन प्रणाली (एन्टिफिडेन्ट) लाई असर गरेर वा श्वासप्रश्वास प्रणाली (फ्युमिगेशन गतिविधि) लाई असर गरेर विषाक्त प्रभाव पार्न सक्छ, 54 जबकि युजेनोल जस्ता फिनाइलप्रोपानोइड्सले मेटाबोलिक इन्जाइमहरूलाई असर गर्न सक्छ 55। त्यसकारण, कार्यको विभिन्न संयन्त्र भएका यौगिकहरूको संयोजनले मिश्रणको समग्र घातक प्रभाव बढाउन सक्छ। युकेलिप्टोल डायलिल डाइसल्फाइड, युकेलिप्टस वा α-पाइनेनसँग समन्वयात्मक पाइयो, तर अन्य यौगिकहरूसँगका अन्य संयोजनहरू या त गैर-लार्भिसिडल वा विरोधी थिए। प्रारम्भिक अध्ययनहरूले देखाए कि युकेलिप्टोलमा एसिटाइलकोलिनेस्टेरेज (AChE), साथै अक्टामाइन र GABA रिसेप्टरहरूमा अवरोधक गतिविधि छ56। चक्रीय मोनोटर्पेन्स, युकेलिप्टोल, युजेनोल, आदिको कार्य संयन्त्र तिनीहरूको न्यूरोटोक्सिक गतिविधि जस्तै हुन सक्छ, 57 जसले गर्दा पारस्परिक अवरोध मार्फत तिनीहरूको संयुक्त प्रभावहरूलाई कम गर्दछ। त्यस्तै गरी, डायलिल डाइसल्फाइड, α-पाइनेन र लिमोनेनसँग टेमेफोसको संयोजन सिनर्जिस्टिक पाइयो, जसले हर्बल उत्पादनहरू र सिंथेटिक अर्गानोफोस्फेटहरू बीचको सिनर्जिस्टिक प्रभावको अघिल्लो रिपोर्टहरूलाई समर्थन गर्दछ।
एडिस एजिप्टाईको लार्भा र वयस्क चरणहरूमा युडेस्मोल र युकेलिप्टोलको संयोजनले सिनर्जिस्टिक प्रभाव पारेको पाइयो, सम्भवतः तिनीहरूको फरक रासायनिक संरचनाका कारण कार्य गर्ने फरक तरिकाहरूको कारणले। युडेस्मोल (एक सेस्क्विटरपीन) ले श्वासप्रश्वास प्रणालीलाई असर गर्न सक्छ 59 र युकेलिप्टोल (एक मोनोटेरपीन) ले एसिटाइलकोलिनेस्टेरेज 60 लाई असर गर्न सक्छ। दुई वा बढी लक्षित साइटहरूमा सामग्रीहरूको सह-एक्सपोजरले संयोजनको समग्र घातक प्रभाव बढाउन सक्छ। वयस्क पदार्थ बायोअसेमा, म्यालाथियन कार्भोन वा युकेलिप्टोल वा युकेलिप्टोल वा डायलिल डाइसल्फाइड वा α-पाइनेनसँग सिनर्जिस्टिक भएको पाइयो, जसले लिमोनेन र डाईको थपको साथ सिनर्जिस्टिक भएको संकेत गर्दछ। एलाइल ट्रिसल्फाइडको अपवाद बाहेक, टेर्पेन यौगिकहरूको सम्पूर्ण पोर्टफोलियोको लागि राम्रो सिनर्जिस्टिक एलरसाइड उम्मेदवारहरू। थाङ्गम र क्याथिरेसन61 ले पनि हर्बल अर्कहरूसँग म्यालाथियनको सिनर्जिस्टिक प्रभावको समान परिणामहरू रिपोर्ट गरे। यो सहक्रियात्मक प्रतिक्रिया कीराको विषाक्तता हटाउने इन्जाइमहरूमा म्यालाथियन र फाइटोकेमिकल्सको संयुक्त विषाक्त प्रभावको कारणले हुन सक्छ। म्यालाथियन जस्ता अर्गानोफोस्फेटहरू सामान्यतया साइटोक्रोम P450 एस्टेरेज र मोनोअक्सिजनेजहरू 62,63,64 लाई रोकेर कार्य गर्छन्। त्यसकारण, म्यालाथियनलाई कार्यका यी संयन्त्रहरूसँग र टर्पेनलाई कार्यका विभिन्न संयन्त्रहरूसँग संयोजन गर्नाले लामखुट्टेहरूमा समग्र घातक प्रभाव बढाउन सक्छ।
अर्कोतर्फ, वैमनस्यले संकेत गर्छ कि चयन गरिएका यौगिकहरू प्रत्येक यौगिकको तुलनामा संयोजनमा कम सक्रिय छन्। केही संयोजनहरूमा वैमनस्यताको कारण यो हुन सक्छ कि एउटा यौगिकले अवशोषण, वितरण, चयापचय, वा उत्सर्जनको दर परिवर्तन गरेर अर्को यौगिकको व्यवहारलाई परिमार्जन गर्दछ। प्रारम्भिक अनुसन्धानकर्ताहरूले यसलाई औषधि संयोजनमा वैमनस्यको कारण मानेका थिए। अणुहरू सम्भावित संयन्त्र ६५। त्यस्तै गरी, वैमनस्यको सम्भावित कारणहरू कार्यको समान संयन्त्र, एउटै रिसेप्टर वा लक्षित साइटको लागि घटक यौगिकहरूको प्रतिस्पर्धासँग सम्बन्धित हुन सक्छन्। केही अवस्थामा, लक्षित प्रोटीनको गैर-प्रतिस्पर्धी अवरोध पनि हुन सक्छ। यस अध्ययनमा, दुई अर्गानोसल्फर यौगिकहरू, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइडले विरोधी प्रभावहरू देखाए, सम्भवतः एउटै लक्षित साइटको लागि प्रतिस्पर्धाको कारणले। त्यस्तै गरी, यी दुई सल्फर यौगिकहरूले विरोधी प्रभावहरू देखाए र युडेस्मोल र α-पाइनेनसँग संयोजन गर्दा कुनै प्रभाव परेन। युडेस्मोल र अल्फा-पाइनेन प्रकृतिमा चक्रीय छन्, जबकि डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्रिसल्फाइड प्रकृतिमा एलिफेटिक छन्। रासायनिक संरचनाको आधारमा, यी यौगिकहरूको संयोजनले समग्र घातक गतिविधि बढाउनु पर्छ किनभने तिनीहरूको लक्ष्य साइटहरू सामान्यतया फरक हुन्छन्34,47, तर प्रयोगात्मक रूपमा हामीले विरोधाभास फेला पार्यौं, जुन अन्तरक्रियाको परिणामस्वरूप केही अज्ञात जीवहरूमा यी यौगिकहरूको भूमिकाको कारण हुन सक्छ। त्यस्तै गरी, सिनेओल र α-पाइनेनको संयोजनले विरोधी प्रतिक्रियाहरू उत्पादन गर्यो, यद्यपि अनुसन्धानकर्ताहरूले पहिले रिपोर्ट गरेका थिए कि दुई यौगिकहरूको कार्यको फरक लक्ष्यहरू छन्47,60। दुवै यौगिकहरू चक्रीय मोनोटरपेन भएकाले, त्यहाँ केही सामान्य लक्ष्य साइटहरू हुन सक्छन् जुन बन्धनको लागि प्रतिस्पर्धा गर्न सक्छन् र अध्ययन गरिएको संयोजन जोडीहरूको समग्र विषाक्ततालाई प्रभाव पार्न सक्छन्।
LC50 मानहरू र अवलोकन गरिएको मृत्युदरको आधारमा, दुई उत्कृष्ट सिनर्जिस्टिक टर्पेन संयोजनहरू चयन गरियो, अर्थात् कार्भोन + लिमोनिन र युकेलिप्टोल + युडेस्मोलको जोडी, साथै टर्पेन्सको साथ सिंथेटिक अर्गानोफोस्फोरस म्यालाथियन। वयस्क कीटनाशक बायोएसेमा म्यालाथियन + युडेस्मोल यौगिकहरूको इष्टतम सिनर्जिस्टिक संयोजन परीक्षण गरिएको थियो। यी प्रभावकारी संयोजनहरूले अपेक्षाकृत ठूलो एक्सपोजर स्पेसहरूमा ठूलो संख्यामा व्यक्तिहरू विरुद्ध काम गर्न सक्छन् कि भनेर पुष्टि गर्न ठूला कीरा उपनिवेशहरूलाई लक्षित गर्नुहोस्। यी सबै संयोजनहरूले कीराहरूको ठूलो झुण्ड विरुद्ध एक सिनर्जिस्टिक प्रभाव प्रदर्शन गर्छन्। एडिस एजिप्टी लार्भाको ठूलो जनसंख्या विरुद्ध परीक्षण गरिएको इष्टतम सिनर्जिस्टिक लार्भासिडल संयोजनको लागि समान परिणामहरू प्राप्त भएका थिए। यसरी, यो भन्न सकिन्छ कि बिरुवा EO यौगिकहरूको प्रभावकारी सिनर्जिस्टिक लार्भासिडल र वयस्कनाशक संयोजन अवस्थित सिंथेटिक रसायनहरू विरुद्ध एक बलियो उम्मेदवार हो र एडिस एजिप्टी जनसंख्या नियन्त्रण गर्न थप प्रयोग गर्न सकिन्छ। त्यस्तै गरी, लामखुट्टेलाई दिइने थाइमेटफोस वा म्यालाथियनको मात्रा कम गर्न सिंथेटिक लार्भिसाइड वा एडल्टिसाइडको प्रभावकारी संयोजन टर्पेनसँग पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ। यी शक्तिशाली सिनर्जिस्टिक संयोजनहरूले एडिस लामखुट्टेमा औषधि प्रतिरोधको विकासमा भविष्यका अध्ययनहरूको लागि समाधान प्रदान गर्न सक्छन्।
एडिस एजिप्टाईका अण्डाहरू क्षेत्रीय चिकित्सा अनुसन्धान केन्द्र, डिब्रुगढ, भारतीय चिकित्सा अनुसन्धान परिषद्बाट सङ्कलन गरिएको थियो र गौहाटी विश्वविद्यालयको प्राणीशास्त्र विभागमा निम्न अवस्थाहरूमा नियन्त्रण गरिएको तापक्रम (२८ ± १ डिग्री सेल्सियस) र आर्द्रता (८५ ± ५%) मा राखिएको थियो: अरिभोली आदि वर्णन गरिएको थियो। अण्डाबाट निस्केपछि, लार्भालाई लार्भाको खाना (कुकुरको बिस्कुट पाउडर र खमीर ३:१ अनुपातमा) खुवाइयो र वयस्कहरूलाई १०% ग्लुकोज घोल खुवाइयो। निस्केको तेस्रो दिनदेखि, वयस्क पोथी लामखुट्टेहरूलाई अल्बिनो मुसाको रगत चुस्न अनुमति दिइयो। फिल्टर पेपरलाई गिलासमा पानीमा भिजाउनुहोस् र अण्डा दिने पिंजडामा राख्नुहोस्।
चयन गरिएका बिरुवाका नमूनाहरू जस्तै युकलिप्टस पातहरू (Myrtaceae), पवित्र तुलसी (Lamiaceae), पुदिना (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) र allium bulbs (Amarillidaceae)। गुवाहाटीबाट सङ्कलन गरिएको र गौहाटी विश्वविद्यालयको वनस्पति विज्ञान विभागद्वारा पहिचान गरिएको। सङ्कलन गरिएका बिरुवाका नमूनाहरू (५०० ग्राम) लाई ६ घण्टासम्म क्लेभेन्जर उपकरण प्रयोग गरेर हाइड्रोडिस्टिलेशन गरिएको थियो। निकालिएको EO सफा गिलासको शीशीमा सङ्कलन गरिएको थियो र थप अध्ययनको लागि ४°C मा भण्डारण गरिएको थियो।
लार्भिसिडल विषाक्तताको अध्ययन थोरै परिमार्जित मानक विश्व स्वास्थ्य संगठन प्रक्रियाहरू 67 प्रयोग गरेर गरिएको थियो। DMSO लाई इमल्सिफायरको रूपमा प्रयोग गर्नुहोस्। प्रत्येक EO सांद्रता सुरुमा 100 र 1000 ppm मा परीक्षण गरिएको थियो, प्रत्येक प्रतिकृतिमा 20 लार्भाहरू उजागर गरियो। नतिजाहरूको आधारमा, एकाग्रता दायरा लागू गरियो र मृत्युदर 1 घण्टा देखि 6 घण्टा (1 घण्टा अन्तरालमा) र उपचार पछि 24 घण्टा, 48 घण्टा र 72 घण्टामा रेकर्ड गरियो। 24, 48 र 72 घण्टाको एक्सपोजर पछि सबलेथल सांद्रता (LC50) निर्धारण गरिएको थियो। प्रत्येक सांद्रतालाई एक नकारात्मक नियन्त्रण (पानी मात्र) र एक सकारात्मक नियन्त्रण (DMSO-प्रक्रिया गरिएको पानी) सँगसँगै तीन प्रतिकृतिमा परीक्षण गरिएको थियो। यदि प्युपेशन हुन्छ र नियन्त्रण समूहको लार्भाको 10% भन्दा बढी मर्छ भने, प्रयोग दोहोर्याइन्छ। यदि नियन्त्रण समूहमा मृत्युदर 5-10% बीचमा छ भने, Abbott सुधार सूत्र 68 प्रयोग गर्नुहोस्।
रामर एट अल ६९ द्वारा वर्णन गरिएको विधिलाई एसीटोनलाई विलायकको रूपमा प्रयोग गरेर एडिस एजिप्टी विरुद्ध वयस्क बायोएसेको लागि प्रयोग गरिएको थियो। प्रत्येक EO लाई सुरुमा १०० र १००० पीपीएमको सांद्रतामा वयस्क एडिस एजिप्टी लामखुट्टे विरुद्ध परीक्षण गरिएको थियो। वाटम्यान नम्बरमा प्रत्येक तयार घोलको २ मिलीलीटर लागू गर्नुहोस्। फिल्टर पेपरको १ टुक्रा (आकार १२ x १५ सेमी२) र एसीटोनलाई १० मिनेटको लागि वाष्पीकरण हुन दिनुहोस्। केवल २ मिलीलीटर एसीटोनले उपचार गरिएको फिल्टर पेपर नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो। एसीटोन वाष्पीकरण भएपछि, उपचार गरिएको फिल्टर पेपर र नियन्त्रण फिल्टर पेपरलाई बेलनाकार ट्यूब (१० सेमी गहिरो) मा राखिन्छ। ३ देखि ४ दिन पुरानो रगत नखाने दसवटा लामखुट्टेलाई प्रत्येक सांद्रताको तीन प्रजातिहरूमा स्थानान्तरण गरिएको थियो। प्रारम्भिक परीक्षणहरूको नतिजाको आधारमा, चयन गरिएका तेलहरूको विभिन्न सांद्रता परीक्षण गरिएको थियो। लामखुट्टे छोडेको १ घण्टा, २ घण्टा, ३ घण्टा, ४ घण्टा, ५ घण्टा, ६ घण्टा, २४ घण्टा, ४८ घण्टा र ७२ घण्टामा मृत्युदर रेकर्ड गरिएको थियो। २४ घण्टा, ४८ घण्टा र ७२ घण्टाको एक्सपोजर समयको लागि LC50 मानहरू गणना गर्नुहोस्। यदि नियन्त्रण लटको मृत्युदर २०% भन्दा बढी छ भने, सम्पूर्ण परीक्षण दोहोर्याउनुहोस्। त्यस्तै गरी, यदि नियन्त्रण समूहमा मृत्युदर ५% भन्दा बढी छ भने, एबटको सूत्र प्रयोग गरेर उपचार गरिएका नमूनाहरूको लागि परिणामहरू समायोजन गर्नुहोस्68।
चयन गरिएका आवश्यक तेलहरूको घटक यौगिकहरूको विश्लेषण गर्न ग्यास क्रोमेटोग्राफी (एजिलेन्ट ७८९०ए) र मास स्पेक्ट्रोमेट्री (अकु TOF GCv, जेओल) गरिएको थियो। GC मा FID डिटेक्टर र केशिका स्तम्भ (HP5-MS) जडान गरिएको थियो। वाहक ग्यास हेलियम थियो, प्रवाह दर १ मिली/मिनेट थियो। GC कार्यक्रमले Allium sativum लाई 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M र Ocimum Saintum लाई 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 मा सेट गर्दछ, पुदिनाको लागि 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, युकलिप्टसको लागि 20.60-1M-10-200-3M-30-280, र रातोको लागि एक हजार तहहरूको लागि तिनीहरू 10:60-1M-8-220-5M-8-270-3M हुन्।
प्रत्येक EO को प्रमुख यौगिकहरू GC क्रोमेटोग्राम र मास स्पेक्ट्रोमेट्री परिणामहरू (NIST 70 मानक डाटाबेसलाई सन्दर्भित) बाट गणना गरिएको क्षेत्र प्रतिशतको आधारमा पहिचान गरिएको थियो।
प्रत्येक EO मा दुई प्रमुख यौगिकहरू GC-MS नतिजाहरूको आधारमा छनोट गरिएको थियो र थप जैव परीक्षणको लागि सिग्मा-एल्ड्रिचबाट ९८-९९% शुद्धतामा खरिद गरिएको थियो। माथि वर्णन गरिए अनुसार एडिस एजिप्टी विरुद्ध लार्भिसिडल र वयस्क प्रभावकारिताको लागि यौगिकहरूको परीक्षण गरिएको थियो। सबैभन्दा सामान्य रूपमा प्रयोग हुने सिंथेटिक लार्भिसिड्स टेमफोसेट (सिग्मा एल्ड्रिच) र वयस्क औषधि म्यालाथियन (सिग्मा एल्ड्रिच) लाई समान प्रक्रिया पछ्याएर चयन गरिएका EO यौगिकहरूसँग तिनीहरूको प्रभावकारिता तुलना गर्न विश्लेषण गरिएको थियो।
चयन गरिएका टर्पेन यौगिकहरू र टर्पेन यौगिकहरू र व्यावसायिक अर्गानोफोस्फेटहरू (टाइलफोस र म्यालाथियन) को बाइनरी मिश्रणहरू प्रत्येक उम्मेदवार यौगिकको LC50 खुराकलाई १:१ अनुपातमा मिसाएर तयार पारिएको थियो। माथि वर्णन गरिए अनुसार तयार पारिएको संयोजनहरू एडिस एजिप्टीको लार्भा र वयस्क चरणहरूमा परीक्षण गरिएको थियो। प्रत्येक जैव परीक्षण प्रत्येक संयोजनको लागि तीन प्रतिलिपिमा र प्रत्येक संयोजनमा उपस्थित व्यक्तिगत यौगिकहरूको लागि तीन प्रतिलिपिमा गरिएको थियो। लक्षित कीराहरूको मृत्यु २४ घण्टा पछि रेकर्ड गरिएको थियो। निम्न सूत्र प्रयोग गरेर बाइनरी मिश्रणको लागि अपेक्षित मृत्युदर गणना गर्नुहोस्।
जहाँ E = बाइनरी संयोजनको प्रतिक्रियामा एडिस एजिप्टाई लामखुट्टेको अपेक्षित मृत्युदर, अर्थात् जडान (A + B)।
Pavla52 द्वारा वर्णन गरिएको विधिद्वारा गणना गरिएको χ2 मानको आधारमा प्रत्येक बाइनरी मिश्रणको प्रभावलाई synergistic, antagonistic, वा कुनै प्रभाव नभएको रूपमा लेबल गरिएको थियो। निम्न सूत्र प्रयोग गरेर प्रत्येक संयोजनको लागि χ2 मान गणना गर्नुहोस्।
गणना गरिएको χ2 मान स्वतन्त्रताको सम्बन्धित डिग्री (९५% आत्मविश्वास अन्तराल) को लागि तालिका मान भन्दा बढी हुँदा र अवलोकन गरिएको मृत्युदर अपेक्षित मृत्युदर भन्दा बढी भएको पाइएमा संयोजनको प्रभावलाई synergistic को रूपमा परिभाषित गरिएको थियो। त्यस्तै गरी, यदि कुनै पनि संयोजनको लागि गणना गरिएको χ2 मान स्वतन्त्रताको केही डिग्रीको साथ तालिका मान भन्दा बढी छ, तर अवलोकन गरिएको मृत्युदर अपेक्षित मृत्युदर भन्दा कम छ भने, उपचारलाई विरोधी मानिन्छ। र यदि कुनै पनि संयोजनमा χ2 को गणना गरिएको मान स्वतन्त्रताको सम्बन्धित डिग्रीमा तालिका मान भन्दा कम छ भने, संयोजनको कुनै प्रभाव छैन भनेर मानिन्छ।
ठूलो संख्यामा कीराहरू विरुद्ध परीक्षणको लागि तीन देखि चार सम्भावित सिनर्जिस्टिक संयोजनहरू (१०० लार्भा र ५० लार्भानाशक र वयस्क कीरा गतिविधि) चयन गरिएको थियो। वयस्कहरू माथिको रूपमा अगाडि बढ्छन्। मिश्रणहरूसँगै, चयन गरिएका मिश्रणहरूमा उपस्थित व्यक्तिगत यौगिकहरू एडिस एजिप्टी लार्भा र वयस्कहरूको समान संख्यामा पनि परीक्षण गरिएको थियो। संयोजन अनुपात एक उम्मेदवार यौगिकको एक भाग LC50 खुराक र अर्को घटक यौगिकको भाग LC50 खुराक हो। वयस्क गतिविधि बायोअसेमा, चयन गरिएका यौगिकहरूलाई विलायक एसीटोनमा घुलनशील एसीटोनमा घुलनशील बनाइयो र १३०० सेन्टिमिटर ३ बेलनाकार प्लास्टिक कन्टेनरमा बेरिएको फिल्टर पेपरमा लागू गरियो। एसीटोनलाई १० मिनेटको लागि वाष्पीकरण गरियो र वयस्कहरूलाई छोडियो। त्यसैगरी, लार्भानाशक बायोअसेमा, LC50 उम्मेदवार यौगिकहरूको खुराकहरू पहिले DMSO को बराबर मात्रामा घुलनशील बनाइयो र त्यसपछि १३०० सीसी प्लास्टिक कन्टेनरमा भण्डारण गरिएको १ लिटर पानीमा मिसाइयो, र लार्भा छोडियो।
LC50 मानहरू गणना गर्न SPSS (संस्करण १६) र Minitab सफ्टवेयर प्रयोग गरेर ७१ रेकर्ड गरिएका मृत्युदर डेटाको सम्भाव्य विश्लेषण गरिएको थियो।
पोस्ट समय: जुलाई-०१-२०२४