एडिस एजिप्टाई (डिप्टेरा: क्युलिसिडे) विरुद्ध लार्भिसाइडल र वयस्क उपायको रूपमा वनस्पतिको आवश्यक तेलहरूमा आधारित टेर्पेन यौगिकहरूको संयोजन।

Nature.com भ्रमण गर्नुभएकोमा धन्यवाद।तपाईंले प्रयोग गरिरहनुभएको ब्राउजरको संस्करणमा सीमित CSS समर्थन छ।उत्कृष्ट नतिजाहरूको लागि, हामी तपाईंलाई आफ्नो ब्राउजरको नयाँ संस्करण प्रयोग गर्न सिफारिस गर्छौं (वा इन्टरनेट एक्सप्लोररमा अनुकूलता मोड असक्षम गर्नुहोस्)।यस बीचमा, निरन्तर समर्थन सुनिश्चित गर्न, हामी स्टाइल वा JavaScript बिना साइट देखाउँदै छौं।
बिरुवाबाट व्युत्पन्न कीटनाशक यौगिकहरूको संयोजनले कीटहरू विरुद्ध समन्वयात्मक वा विरोधी अन्तरक्रियाहरू प्रदर्शन गर्न सक्छ।एडिस लामखुट्टेले फैलिने रोगको द्रुत फैलावट र परम्परागत कीटनाशकहरूमा एडिस लामखुट्टेको जनसंख्याको बढ्दो प्रतिरोधलाई ध्यानमा राख्दै, बिरुवाको आवश्यक तेलहरूमा आधारित टर्पेन यौगिकहरूको अट्ठाईस संयोजनहरू एडिस एजिप्टीको लार्भा र वयस्क अवस्थाहरू विरुद्ध तयार गरी परीक्षण गरियो।पाँचवटा बिरुवा आवश्यक तेलहरू (EOs) प्रारम्भिक रूपमा तिनीहरूको लार्भिसिडल र वयस्क-प्रयोग प्रभावकारिताको लागि मूल्याङ्कन गरिएको थियो, र GC-MS परिणामहरूमा आधारित प्रत्येक EO मा दुई प्रमुख यौगिकहरू पहिचान गरियो।मुख्य पहिचान गरिएका यौगिकहरू खरिद गरिएका थिए, जस्तै डायलिल डाइसल्फाइड, डायलिल ट्राइसल्फाइड, कार्भोन, लिमोनिन, युजेनोल, मिथाइल युजेनोल, युकेलिप्टोल, युडेमोल र लामखुट्टे अल्फा-पाइनेन।यी यौगिकहरूको बाइनरी संयोजनहरू सबलेथल खुराकहरू प्रयोग गरेर तयार पारिएका थिए र तिनीहरूको समन्वयात्मक र विरोधी प्रभावहरू परीक्षण र निर्धारण गरियो।सबैभन्दा राम्रो लार्भिसाइडल रचनाहरू लिमोनिनलाई डायलिल डाइसल्फाइडसँग मिसाएर प्राप्त गरिन्छ, र उत्तम एडल्टिसाइडल रचनाहरू लिमोनिनसँग कार्भोन मिसाएर प्राप्त गरिन्छ।व्यावसायिक रूपमा प्रयोग हुने सिंथेटिक लार्भिसाइड टेम्फोस र वयस्क औषधि म्यालाथियनलाई छुट्टाछुट्टै र बाइनरी संयोजनमा टेरपेनोइडसँग परीक्षण गरिएको थियो।नतिजाले टेमेफोस र डायलिल डाइसल्फाइड र म्यालाथियन र युडेमोलको संयोजन सबैभन्दा प्रभावकारी भएको देखाएको छ।यी शक्तिशाली संयोजनहरूले एडिस एजिप्टाई विरुद्ध प्रयोग गर्न सक्ने क्षमता राख्छन्।
प्लान्ट आवश्यक तेलहरू (EOs) विभिन्न बायोएक्टिभ यौगिकहरू समावेश गर्ने माध्यमिक मेटाबोलाइटहरू हुन् र सिंथेटिक कीटनाशकहरूको विकल्पको रूपमा बढ्दो रूपमा महत्त्वपूर्ण हुँदै गइरहेका छन्।तिनीहरू पर्यावरण अनुकूल र प्रयोगकर्ता-अनुकूल मात्र होइनन्, तर तिनीहरू विभिन्न बायोएक्टिभ यौगिकहरूको मिश्रण पनि हुन्, जसले औषधि प्रतिरोधक क्षमता विकास गर्ने सम्भावनालाई पनि कम गर्छ।GC-MS प्रविधि प्रयोग गरेर, अन्वेषकहरूले विभिन्न वनस्पति आवश्यक तेलहरूको घटकहरू जाँच गरे र 17,500 सुगन्धित बिरुवाहरूबाट 3,000 भन्दा बढी यौगिकहरू पहिचान गरे, जसमध्ये अधिकांश कीटनाशक गुणहरूको लागि परीक्षण गरिएको थियो र कीटनाशक प्रभावहरू 3,4 भएको रिपोर्ट गरिएको छ।केही अध्ययनहरूले हाइलाइट गर्दछ कि यौगिकको मुख्य घटकको विषाक्तता यसको कच्चा इथिलीन अक्साइडको जत्तिकै वा बढी छ।तर व्यक्तिगत यौगिकहरूको प्रयोगले फेरि प्रतिरोधको विकासको लागि ठाउँ छोड्न सक्छ, जस्तै रासायनिक कीटनाशकहरूको मामलामा 5,6।तसर्थ, हालको फोकस कीटनाशक प्रभावकारिता सुधार गर्न र लक्षित कीट जनसंख्यामा प्रतिरोधको सम्भावना कम गर्न इथाइलिन अक्साइड-आधारित यौगिकहरूको मिश्रणहरू तयार गर्नेमा छ।EOs मा उपस्थित व्यक्तिगत सक्रिय यौगिकहरूले EO को समग्र गतिविधिलाई प्रतिबिम्बित गर्ने संयोजनमा synergistic वा विरोधी प्रभावहरू प्रदर्शन गर्न सक्छ, यो तथ्य जुन अघिल्लो अनुसन्धानकर्ताहरू द्वारा आयोजित अध्ययनहरूमा राम्रोसँग जोडिएको छ7,8।भेक्टर नियन्त्रण कार्यक्रमले EO र यसको कम्पोनेन्टहरू पनि समावेश गर्दछ।क्युलेक्स र एनोफिलिस लामखुट्टेहरूमा आवश्यक तेलहरूको लामखुट्टे मार्ने गतिविधि व्यापक रूपमा अध्ययन गरिएको छ।धेरै अध्ययनहरूले समग्र विषाक्तता बढाउन र साइड इफेक्टहरू कम गर्न विभिन्न बोटबिरुवाहरूलाई व्यावसायिक रूपमा प्रयोग हुने सिंथेटिक कीटनाशकहरू मिलाएर प्रभावकारी कीटनाशकहरू विकास गर्ने प्रयास गरेका छन्।तर एडिस एजिप्टाई विरुद्ध त्यस्ता यौगिकहरूको अध्ययन दुर्लभ छ।चिकित्सा विज्ञानमा भएको प्रगति र औषधि र खोपको विकासले केही भेक्टर-जन्म रोगहरूसँग लड्न मद्दत गरेको छ।तर एडिस एजिप्टाई लामखुट्टेबाट सर्ने भाइरसका विभिन्न सेरोटाइपको उपस्थितिले खोप कार्यक्रम असफल भएको छ।त्यसकारण, जब त्यस्ता रोगहरू देखा पर्दछ, भेक्टर नियन्त्रण कार्यक्रमहरू रोगको फैलावट रोक्नको लागि एक मात्र विकल्प हो।वर्तमान परिदृश्यमा, एडिस एजिप्टाईको नियन्त्रण धेरै महत्त्वपूर्ण छ किनभने यो विभिन्न भाइरसहरू र तिनीहरूको सेरोटाइपहरू डेंगु ज्वरो, जिका, डेंगु हेमोरेजिक ज्वरो, पहेंलो ज्वरो, आदिको प्रमुख भेक्टर हो। लगभग सबै भेक्टर-जन्म एडिस-जनित रोगहरू इजिप्टमा हरेक वर्ष बढ्दै गएका छन् र विश्वव्यापी रूपमा बढ्दै छन्।तसर्थ, यस सन्दर्भमा, एडिस एजिप्टाई जनसंख्याको लागि वातावरण मैत्री र प्रभावकारी नियन्त्रण उपायहरू विकास गर्न तत्काल आवश्यकता छ।यस सम्बन्धमा सम्भावित उम्मेद्वारहरू EO, तिनीहरूको घटक यौगिकहरू, र तिनीहरूको संयोजनहरू हुन्।तसर्थ, यस अध्ययनले कीटनाशक गुणहरू (जस्तै, टकसाल, पवित्र तुलसी, नीलगिरी, एलियम सल्फर र मेललेउका) एडिस एजिप्टाई विरुद्ध पाँचवटा बिरुवाहरूबाट प्रमुख बिरुवाको EO यौगिकहरूको प्रभावकारी समन्वयात्मक संयोजन पहिचान गर्ने प्रयास गरेको छ।
सबै चयन गरिएका EOs ले 0.42 देखि 163.65 ppm सम्मको 24-h LC50 सँग एडिस एजिप्टाई विरुद्ध सम्भावित लार्भिसिडल गतिविधि देखाएको छ।24 घन्टा (तालिका 1) मा 0.42 पीपीएमको LC50 मानको साथ पेपरमिन्ट (एमपी) ईओको लागि उच्चतम लार्भिसाइड गतिविधि रेकर्ड गरिएको थियो, त्यसपछि लसुन (एएस) 16.19 पीपीएमको LC50 मान 24 घन्टा (तालिका 1) मा रेकर्ड गरिएको थियो।
Ocimum Sainttum, Os EO को अपवाद बाहेक, अन्य चार स्क्रिन गरिएका EOs ले 24-घण्टा एक्सपोजर अवधिमा 23.37 देखि 120.16 पीपीएम सम्मको LC50 मानहरूसँग स्पष्ट एलर्जी प्रभावहरू देखाए।Thymophilus striata (Cl) EO LC50 मान 23.37 ppm भएको 24 घण्टा भित्र वयस्कहरूलाई मार्न सबैभन्दा प्रभावकारी थियो, त्यसपछि Eucalyptus maculata (Em) जसको LC50 मान 101.91 ppm (तालिका 1) थियो।अर्कोतर्फ, Os को लागि LC50 मान अझै निर्धारण गरिएको छैन किनकि उच्चतम खुराकमा 53% को उच्चतम मृत्यु दर रेकर्ड गरिएको थियो (पूरक चित्र 3)।
प्रत्येक EO मा दुई प्रमुख घटक यौगिकहरू NIST पुस्तकालय डाटाबेस परिणामहरू, GC क्रोमेटोग्राम क्षेत्र प्रतिशत, र MS स्पेक्ट्रा परिणामहरू (तालिका 2) को आधारमा पहिचान गरी चयन गरिएको थियो।EO As का लागि, पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्राइसल्फाइड थिए;EO Mp का लागि पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू carvone र limonene थिए, EO Em का लागि पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू eudesmol र eucalyptol थिए;EO Os को लागि, पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू eugenol र methyl eugenol थिए, र EO Cl को लागि, पहिचान गरिएका मुख्य यौगिकहरू eugenol र α-pinene (चित्र 1, पूरक आंकडा 5-8, पूरक तालिका 1-5) थिए।
चयन गरिएका आवश्यक तेलहरूको मुख्य टेरपेनोइड्सको मास स्पेक्ट्रोमेट्रीका परिणामहरू (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-methyl eugenol; E-limonene; F-सुगन्धित सेपेरोन; G-α-pinene; H-cineole आर-युडामोल)।
कुल नौ यौगिकहरू (डायलिल डाइसल्फाइड, डायलिल ट्राइसल्फाइड, युजेनोल, मिथाइल युजेनोल, कार्भोन, लिमोनेन, युकेलिप्टोल, युडेमोल, α-पाइनेन) प्रभावकारी यौगिकहरूका रूपमा पहिचान गरिएको थियो जुन EO को मुख्य घटक हुन् र व्यक्तिगत रूपमा एडिस एजिप्टी विरुद्ध बायोसेड गरिएको थियो। चरणहरू।।कम्पाउन्ड युडेस्मोलमा २४ घण्टाको एक्सपोजर पछि २.२५ पीपीएमको LC50 मानको साथ उच्चतम लार्भिसाइडल गतिविधि थियो।डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्राइसल्फाइड यौगिकहरूमा पनि 10-20 पीपीएमको दायरामा सब्बलेथल डोजको साथ सम्भावित लार्भिसाइड प्रभावहरू फेला परेको छ।63.35 पीपीएम, 139.29 पीपीएमको LC50 मानहरू सहित युजेनोल, लिमोनिन र युकेलिप्टोल यौगिकहरूको लागि मध्यम लार्भिसिडल गतिविधि फेरि देखियो।र 181.33 पीपीएम 24 घण्टा पछि, क्रमशः (तालिका 3)।यद्यपि, मिथाइल युजेनोल र कार्भोनको कुनै महत्त्वपूर्ण लार्भिसिडल क्षमता उच्चतम खुराकहरूमा पनि फेला परेन, त्यसैले LC50 मानहरू गणना गरिएको थिएन (तालिका 3)।सिंथेटिक लार्भिसाइड टेमेफोसको 24 घण्टामा एडिस एजिप्टाई विरुद्ध औसत घातक सांद्रता 0.43 पीपीएम थियो (तालिका 3, पूरक तालिका 6)।
सात यौगिकहरू (डायलिल डाइसल्फाइड, डायलिल ट्राइसल्फाइड, युकलिप्टोल, α-पाइनेन, युडेमोल, लिमोनेन र कार्भोन) प्रभावकारी EO को मुख्य यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरियो र वयस्क इजिप्टियन एडिस लामखुट्टे विरुद्ध व्यक्तिगत रूपमा परीक्षण गरियो।प्रोबिट रिग्रेसन विश्लेषणका अनुसार, Eudesmol मा LC50 मान 1.82 ppm संग उच्चतम क्षमता भएको फेला पर्यो, त्यसपछि 24-घण्टा एक्सपोजर समयमा 17.60 ppm को LC50 मानको साथ Eucalyptol।परीक्षण गरिएका बाँकी पाँच यौगिकहरू LC50 140.79 देखि 737.01 ppm (तालिका 3) सम्मका वयस्कहरूका लागि मध्यम हानिकारक थिए।सिंथेटिक अर्गानोफोस्फोरस म्यालाथियन युडेमोल भन्दा कम शक्तिशाली थियो र 24-घण्टा एक्सपोजर अवधि (तालिका 3, पूरक तालिका 6) मा LC50 मान 5.44 पीपीएमको साथ अन्य छवटा यौगिकहरू भन्दा उच्च थियो।
सात शक्तिशाली सीसा यौगिकहरू र अर्गानोफोस्फोरस टेमेफोसेटलाई 1:1 अनुपातमा तिनीहरूको LC50 खुराकहरूको बाइनरी संयोजनहरू बनाउन चयन गरिएको थियो।कुल 28 बाइनरी संयोजनहरू एडिस एजिप्टाई विरुद्ध तिनीहरूको लार्भिसिडल प्रभावकारिताको लागि तयार र परीक्षण गरियो।नौ संयोजनहरू सिनर्जिस्टिक फेला परे, 14 संयोजनहरू विरोधी थिए, र पाँच संयोजनहरू लार्भिसाइडल थिएनन्।synergistic संयोजनहरू मध्ये, डायलिल डाइसल्फाइड र टेमोफोलको संयोजन सबैभन्दा प्रभावकारी थियो, 24 घण्टा पछि 100% मृत्यु दर देखियो (तालिका 4)।त्यसैगरी, डायलिल डाइसल्फाइडसँग लिमोनिन र थाइमेटफोससँग युजेनोलको मिश्रणले 98.3% (तालिका 5) को पर्यवेक्षित लार्भा मृत्युदरसँग राम्रो सम्भावना देखायो।बाँकी 4 संयोजनहरू, जस्तै eudesmol प्लस eucalyptol, eudesmol plus limonene, eucalyptol plus alpha-pinene, alpha-pinene plus temephos ले पनि उल्लेखनीय लार्भिसाइडल प्रभावकारिता देखाएको छ, मृत्यु दर 90% भन्दा बढी रहेको देखियो।अपेक्षित मृत्यु दर 60-75% को नजिक छ।(तालिका ४)।यद्यपि, α-pinene वा eucalyptus सँग limonene को संयोजनले विरोधी प्रतिक्रियाहरू देखायो।त्यसैगरी, टेमफोसको युजेनोल वा युकलिप्टस वा युडेमोल वा डायलिल ट्राइसल्फाइडको मिश्रणले पनि विरोधी प्रभावहरू पाइन्छ।त्यस्तै गरी, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्राइसल्फाइडको संयोजन र यी यौगिकहरू मध्ये कुनै एकको युडेमोल वा युजेनोलको संयोजन तिनीहरूको लार्भिसाइडल कार्यमा विरोधी हो।eugenol वा α-pinene संग eudesmol को संयोजन संग विरोधीता पनि रिपोर्ट गरिएको छ।
वयस्क अम्लीय गतिविधिको लागि परीक्षण गरिएका सबै 28 बाइनरी मिश्रणहरू मध्ये, 7 संयोजनहरू समन्वयवादी थिए, 6 कुनै प्रभाव थिएन, र 15 विरोधी थिए।eudesmol को eucalyptus र carvone संग limonene को मिश्रण अन्य synergistic संयोजनहरु भन्दा बढी प्रभावकारी पाइयो, मृत्यु दर 24 घण्टामा क्रमशः 76% र 100% (तालिका 5)।लिमोनिन र डायलिल ट्राइसल्फाइड बाहेक सबै यौगिकहरूको संयोजनसँग म्यालाथियनले एक सिनेर्जिस्टिक प्रभाव प्रदर्शन गर्न अवलोकन गरेको छ।अर्कोतर्फ, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्राइसल्फाइड र ती मध्ये कुनै एकको युकलिप्टस, वा युकलिप्टोल, वा कार्भोन, वा लिमोनिनको संयोजनको बीचमा वैरभाव फेला परेको छ।त्यसैगरी, α-pinene को eudesmol वा limonene, eucalyptol with carvone वा limonene, र limonene eudesmol or malathion ले विरोधी लार्भिसाइडल प्रभाव देखायो।बाँकी छवटा संयोजनहरूको लागि, अपेक्षित र अवलोकन गरिएको मृत्युदर (तालिका 5) बीच कुनै महत्त्वपूर्ण भिन्नता थिएन।
synergistic प्रभाव र sublethal खुराक को आधार मा, Aedes aegypti लामखुट्टे को एक ठूलो संख्या विरुद्ध तिनीहरूको लार्भिसाइडल विषाक्तता अन्ततः चयन गरियो र थप परीक्षण गरियो।नतिजाहरूले देखाए कि बाइनरी संयोजन युजेनोल-लिमोनेन, डायलिल डाइसल्फाइड-लिमोनिन र डायलिल डाइसल्फाइड-टाइमफोसको प्रयोग गरी लार्भा मृत्युदर 100% थियो, जबकि अपेक्षित लार्भा मृत्युदर 76.48%, 72.16% र 63.4% (क्रमशः 63.4%, योग्य) थियो।।Limonene र eudesmol को संयोजन अपेक्षाकृत कम प्रभावकारी थियो, 88% लार्भा मृत्यु दर 24-घण्टा एक्सपोजर अवधि (तालिका 6) मा अवलोकन गरिएको थियो।संक्षेपमा, चार चयन गरिएका बाइनरी संयोजनहरूले ठूलो मात्रामा लागू गर्दा एडिस एजिप्टाई विरुद्ध सिनर्जीस्टिक लार्भिसाइडल प्रभावहरू पनि देखाउँछन् (तालिका 6)।
वयस्क एडिस एजिप्टाईको ठूलो जनसंख्यालाई नियन्त्रण गर्न एडल्टोसिडल बायोअसेका लागि तीन सिनेर्जस्टिक संयोजनहरू चयन गरिएको थियो।ठूला कीराको उपनिवेशहरूमा परीक्षण गर्न संयोजनहरू चयन गर्न, हामीले पहिले दुईवटा उत्कृष्ट सिनर्जेस्टिक टेर्पेन संयोजनहरूमा ध्यान केन्द्रित गर्यौं, अर्थात् कार्भोन प्लस लिमोनिन र युकेलिप्टोल प्लस युडेमोल।दोस्रो, सिंथेटिक अर्गानोफोस्फेट म्यालाथियन र टेरपेनोइड्सको संयोजनबाट उत्कृष्ट सिनेर्जस्टिक संयोजन चयन गरिएको थियो।हामी विश्वास गर्छौं कि म्यालाथियन र युडेमोलको संयोजन ठूला कीराहरूको उपनिवेशहरूमा परीक्षणको लागि सबैभन्दा राम्रो संयोजन हो किनभने उच्च अवलोकन गरिएको मृत्युदर र उम्मेदवार सामग्रीहरूको धेरै कम LC50 मानहरू।म्यालाथियनले α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptus, carvone र eudesmol सँग संयोजनमा सिनर्जिज्म प्रदर्शन गर्दछ।तर यदि हामीले LC50 मानहरू हेर्छौं भने, Eudesmol सँग सबैभन्दा कम मूल्य (2.25 ppm) छ।म्यालाथियन, α-पाइनेन, डायलिल डाइसल्फाइड, युकलिप्टोल र कार्भोनको गणना गरिएको LC50 मानहरू 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 र 140.79 ppm थिए।क्रमशः।यी मानहरूले संकेत गर्दछ कि म्यालाथियन र युडेमोलको संयोजन खुराकको सन्दर्भमा इष्टतम संयोजन हो।परिणामहरूले देखाएको छ कि कार्भोन प्लस लिमोनिन र युडेमोल प्लस म्यालाथियनको संयोजनले 61% देखि 65% को अपेक्षित मृत्युदरको तुलनामा 100% मृत्युदर देखाएको छ।अर्को संयोजन, eudesmol plus eucalyptol ले 60% को अपेक्षित मृत्यु दरको तुलनामा, 24 घण्टाको एक्सपोजर पछि 78.66% को मृत्यु दर देखायो।सबै तीनवटा चयन गरिएका संयोजनहरूले वयस्क एडिस एजिप्टी (तालिका 6) विरुद्ध ठूलो मात्रामा लागू गर्दा पनि समन्वयात्मक प्रभावहरू देखाउँछन्।
यस अध्ययनमा, Mp, As, Os, Em र Cl जस्ता चयनित बिरुवा EOs ले एडिस एजिप्टाईको लार्भा र वयस्क अवस्थाहरूमा आशाजनक घातक प्रभावहरू देखाए।Mp EO मा LC50 मान 0.42 ppm संग उच्चतम लार्भिसिडल गतिविधि थियो, त्यसपछि As, Os र Em EOs को LC50 मान 50 ppm भन्दा कम 24 घण्टा पछि।यी नतिजाहरू लामखुट्टे र अन्य डिप्टेरस फ्लाइहरू 10,11,12,13,14 को अघिल्लो अध्ययन संग संगत छन्।यद्यपि Cl को लार्भिसाइडल क्षमता अन्य आवश्यक तेलहरू भन्दा कम छ, LC50 मान 163.65 ppm संग 24 घण्टा पछि, यसको वयस्क क्षमता 24 घण्टा पछि LC50 मान 23.37 ppm संग उच्चतम छ।Mp, As र Em EOs ले एक्सपोजरको 24 घण्टामा 100-120 पीपीएमको दायरामा LC50 मानहरूसँग राम्रो एलर्जीडल क्षमता देखाएको छ, तर तिनीहरूको लार्भिसिडल प्रभावकारिता भन्दा अपेक्षाकृत कम थियो।अर्कोतर्फ, EO Os ले उच्चतम चिकित्सीय खुराकमा पनि नगण्य एलर्जीडल प्रभाव देखाएको छ।यसरी, नतिजाहरूले संकेत गर्दछ कि बिरुवाहरूमा इथिलीन अक्साइडको विषाक्तता लामखुट्टेको विकासको चरणको आधारमा भिन्न हुन सक्छ।यो किराको शरीरमा EOs को प्रवेशको दर, विशिष्ट लक्ष्य इन्जाइमहरूसँग तिनीहरूको अन्तरक्रिया, र प्रत्येक विकासको चरणमा लामखुट्टेको डिटोक्सिफिकेशन क्षमतामा पनि निर्भर गर्दछ।ठूलो संख्यामा अध्ययनहरूले देखाएको छ कि मुख्य कम्पोनेन्ट कम्पाउन्ड इथिलीन अक्साइडको जैविक गतिविधिमा एक महत्त्वपूर्ण कारक हो, किनकि यसले कुल यौगिकहरूको बहुमत 3,12,17,18 हो।त्यसकारण, हामीले प्रत्येक EO मा दुई मुख्य यौगिकहरू विचार गर्यौं।GC-MS नतिजाहरूको आधारमा, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्राइसल्फाइडलाई EO As को प्रमुख यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरिएको थियो, जुन अघिल्लो रिपोर्टहरू 19,20,21 सँग मेल खान्छ।यद्यपि अघिल्लो रिपोर्टहरूले संकेत गरे कि मेन्थोल यसको मुख्य यौगिकहरू मध्ये एक थियो, कार्भोन र लिमोनिन पुन: Mp EO22,23 को मुख्य यौगिकहरूको रूपमा पहिचान गरियो।Os EO को कम्पोजिसन प्रोफाइलले देखायो कि eugenol र methyl eugenol मुख्य यौगिकहरू हुन्, जुन पहिलेका शोधकर्ताहरूको खोजसँग मिल्दोजुल्दो छ 16,24।Eucalyptol र eucalyptol लाई Em पातको तेलमा रहेको मुख्य यौगिकहरूको रूपमा रिपोर्ट गरिएको छ, जुन केही अनुसन्धानकर्ताहरूको निष्कर्षसँग मेल खान्छ 25,26 तर ओलालेड एट अल.27 को निष्कर्षहरूको विपरीत।मेलेलुका आवश्यक तेलमा सिनेओल र α-pinene को प्रभुत्व देखियो, जुन अघिल्लो अध्ययनहरू 28,29 जस्तै छ।बिभिन्न स्थानहरूमा एउटै बिरुवा प्रजातिहरूबाट निकालिएका आवश्यक तेलहरूको संरचना र एकाग्रतामा अन्तरविशिष्ट भिन्नताहरू रिपोर्ट गरिएको छ र यस अध्ययनमा पनि अवलोकन गरिएको छ, जुन भौगोलिक बिरुवाको वृद्धि अवस्था, फसल काट्ने समय, विकास चरण, वा बिरुवाको उमेरबाट प्रभावित हुन्छ।केमोटाइपको उपस्थिति, आदि। 22,30,31,32।मुख्य पहिचान गरिएका यौगिकहरू त्यसपछि तिनीहरूको लार्भिसाइडल प्रभाव र वयस्क एडिस एजिप्टाई लामखुट्टेहरूमा प्रभावहरूको लागि खरिद गरी परीक्षण गरियो।नतिजाहरूले देखाए कि डायलिल डाइसल्फाइडको लार्भिसिडल गतिविधि कच्चा ईओ एसको तुलनामा तुलनात्मक थियो।तर diallyl trisulfide को गतिविधि EO As भन्दा उच्च छ।यी नतिजाहरू Kimbaris et al द्वारा प्राप्त गरिएका जस्तै छन्।क्युलेक्स फिलिपिन्समा 33।यद्यपि, यी दुई यौगिकहरूले लक्षित लामखुट्टेहरू विरुद्ध राम्रो अटोसिडल गतिविधि देखाउँदैनन्, जुन Tenebrio molitor मा Plata-Rueda et al 34 को नतिजाहरूसँग मिल्दोजुल्दो छ।Os EO एडिस एजिप्टाईको लार्भा स्टेज विरुद्ध प्रभावकारी हुन्छ तर वयस्क अवस्था विरुद्ध होइन।यो स्थापित गरिएको छ कि मुख्य व्यक्तिगत यौगिकहरूको लार्विसिडल गतिविधि कच्चा Os EO को भन्दा कम छ।यसले अन्य यौगिकहरूको भूमिका र कच्चा इथिलीन अक्साइडमा तिनीहरूको अन्तरक्रियालाई संकेत गर्दछ।मिथाइल युजेनोलमा मात्र नगण्य गतिविधि हुन्छ, जबकि युजेनोलमा मात्रै मध्यम लार्भिसिडल गतिविधि हुन्छ।यो निष्कर्षले एकातिर ३५,३६ पुष्टि गर्छ भने अर्कोतर्फ, अघिल्लो अनुसन्धानकर्ता ३७,३८ को निष्कर्षको खण्डन गर्दछ।eugenol र methyleugenol को कार्यात्मक समूहहरूमा भिन्नताले एउटै लक्षित कीरामा विभिन्न विषाक्तताहरू निम्त्याउन सक्छ।लिमोनिनमा मध्यम लार्भिसाइडल गतिविधि भएको पाइयो, जबकि कार्भोनको प्रभाव नगण्य थियो।त्यसै गरी, वयस्क कीराहरूमा लिमोनेनको तुलनात्मक रूपमा कम विषाक्तता र कार्भोनको उच्च विषाक्तताले केही अघिल्लो अध्ययनहरूको नतिजालाई समर्थन गर्दछ40 तर अरूलाई विरोध गर्दछ।दुवै इन्ट्रासाइक्लिक र एक्सोसाइक्लिक स्थितिहरूमा डबल बन्डको उपस्थितिले यी यौगिकहरूको लाभलाई लार्भिसाइड्स 3,41 को रूपमा बढाउन सक्छ, जबकि कार्भोन, जो असंतृप्त अल्फा र बीटा कार्बनहरू भएको केटोन हो, वयस्कहरूमा विषाक्तताको उच्च सम्भावना प्रदर्शन गर्न सक्छ।यद्यपि, लिमोनिन र कार्भोनको व्यक्तिगत विशेषताहरू कुल EO Mp (तालिका 1, तालिका 3) भन्दा धेरै कम छन्।परीक्षण गरिएका टेरपेनोइडहरू मध्ये, eudesmol मा LC50 मान 2.5 ppm भन्दा कम भएको सबैभन्दा ठूलो लार्भिसाइडल र वयस्क गतिविधि फेला पर्‍यो, जसले यसलाई एडिस लामखुट्टेको नियन्त्रणको लागि एक आशाजनक कम्पाउन्ड बनाउँछ।यसको कार्यसम्पादन सम्पूर्ण EO Em को भन्दा राम्रो छ, यद्यपि यो Cheng et al.40 को खोजहरूसँग मेल खाँदैन।Eudesmol दुई आइसोप्रिन एकाइहरू भएको सेस्किटरपीन हो जुन युकलिप्टस जस्ता अक्सिजनयुक्त मोनोटेर्पेनहरू भन्दा कम वाष्पशील हुन्छ र यसैले कीटनाशकको ​​रूपमा ठूलो सम्भावना हुन्छ।Eucalyptol आफैंमा लार्भिसिडल गतिविधि भन्दा ठूलो वयस्क हुन्छ, र पहिलेका अध्ययनहरूको नतिजाले यसलाई समर्थन र खण्डन गर्दछ 37,43,44।एक्लै गतिविधि लगभग सम्पूर्ण EO Cl सँग तुलनात्मक छ।अर्को bicyclic monoterpene, α-pinene, एडिस एजिप्टाईमा लार्भिसाइडल प्रभाव भन्दा कम वयस्क प्रभाव हुन्छ, जुन पूर्ण EO Cl को प्रभावको विपरीत हो।टेरपेनोइडहरूको समग्र कीटनाशक गतिविधि तिनीहरूको लिपोफिलिसिटी, अस्थिरता, कार्बन शाखा, प्रक्षेपण क्षेत्र, सतह क्षेत्र, कार्यात्मक समूहहरू र तिनीहरूको स्थिति 45,46 द्वारा प्रभावित हुन्छ।यी यौगिकहरूले कोशिकाको संचयलाई नष्ट गरेर, श्वासप्रश्वासको गतिविधिलाई अवरुद्ध गर्ने, तंत्रिका आवेगहरूको प्रसारणमा बाधा पुर्‍याएर कार्य गर्न सक्छ। 47 सिंथेटिक अर्गानोफोस्फेट टेमेफोसमा 0.43 पीपीएमको LC50 मानको साथ उच्चतम लार्भिसाइडल गतिविधि भएको पाइयो, जुन लेकको डाटासँग मेल खान्छ। Utala48.सिंथेटिक अर्गानोफोस्फोरस म्यालाथियनको वयस्क गतिविधि 5.44 पीपीएममा रिपोर्ट गरिएको थियो।यद्यपि यी दुई अर्गानोफोस्फेटहरूले एडिस एजिप्टाईको प्रयोगशाला स्ट्रेनहरू विरुद्ध अनुकूल प्रतिक्रियाहरू देखाएको छ, तर संसारका विभिन्न भागहरूमा यी यौगिकहरूको लागि लामखुट्टे प्रतिरोधी रिपोर्ट गरिएको छ।यद्यपि, हर्बल औषधिहरूको प्रतिरोधको विकासको कुनै समान रिपोर्टहरू फेला परेका छैनन् 50।यसरी, भेक्टर नियन्त्रण कार्यक्रमहरूमा वनस्पतिहरूलाई रासायनिक कीटनाशकहरूको सम्भावित विकल्पको रूपमा लिइन्छ।
लार्भिसिडल प्रभाव 28 बाइनरी संयोजनहरू (1:1) मा थाइमेटफोसको साथ शक्तिशाली टेरपेनोइड र टेरपेनोइडहरूबाट तयार पारिएको परीक्षण गरिएको थियो, र 9 संयोजनहरू सिनर्जीस्टिक, 14 विरोधी र 5 विरोधी पाइयो।प्रभाव छैन।अर्कोतर्फ, वयस्क क्षमता बायोएसेमा, 7 संयोजनहरू समन्वयात्मक, 15 संयोजनहरू विरोधी थिए, र 6 संयोजनहरूले कुनै असर नगरेको रिपोर्ट गरिएको थियो।केही संयोजनहरूले एक सिनेर्जस्टिक प्रभाव उत्पन्न गर्ने कारण विभिन्न महत्त्वपूर्ण मार्गहरूमा एकैसाथ अन्तरक्रिया गर्ने उम्मेदवार यौगिकहरू, वा एक विशेष जैविक मार्गको विभिन्न कुञ्जी इन्जाइमहरूको अनुक्रमिक अवरोधको कारण हुन सक्छ।डायलिल डाइसल्फाइड, युकलिप्टस वा युजेनोलसँग लिमोनिनको संयोजन साना र ठूला दुवै प्रकारका अनुप्रयोगहरूमा सिनर्जिस्टिक भएको पाइयो (तालिका 6), जबकि युकलिप्टस वा α-पाइनेनसँग यसको संयोजनले लार्भामा विरोधी प्रभावहरू पाइयो।औसतमा, लिमोनिन राम्रो सिनर्जिस्ट जस्तो देखिन्छ, सम्भवतः मिथाइल समूहहरूको उपस्थिति, स्ट्र्याटम कोर्नियममा राम्रो प्रवेश, र कार्यको फरक संयन्त्रको कारणले गर्दा।यो पहिले रिपोर्ट गरिएको छ कि लिमोनिनले कीराको क्युटिकल्स (सम्पर्क विषाक्तता) भित्र पसेर, पाचन प्रणाली (एन्टिफिडेन्ट) लाई असर गरेर, वा श्वासप्रश्वास प्रणाली (फ्युमिगेशन गतिविधि) लाई असर गरी विषाक्त प्रभाव पार्न सक्छ, 54 जबकि फेनिलप्रोपनोइड्स जस्तै युजेनोलले मेटाबोलिक इन्जाइमहरू 55 लाई असर गर्न सक्छ। त्यसकारण, कार्यको विभिन्न संयन्त्रहरूसँग यौगिकहरूको संयोजनले मिश्रणको समग्र घातक प्रभाव बढाउन सक्छ।युकलिप्टोल डायलिल डाइसल्फाइड, युकलिप्टस वा α-पाइनेनसँग समन्वयात्मक भएको पाइयो, तर अन्य यौगिकहरूका साथ अन्य संयोजनहरू गैर-लार्भिसिडल वा विरोधी थिए।प्रारम्भिक अध्ययनहरूले देखाए कि eucalyptol को acetylcholinesterase (AChE), साथै अक्टामाइन र GABA रिसेप्टर्समा अवरोध गर्ने गतिविधि छ।चूंकि चक्रीय मोनोटेरपेन्स, युकेलिप्टोल, युजेनोल, इत्यादिको न्युरोटोक्सिक गतिविधि जस्तै कार्यको संयन्त्र हुन सक्छ, 57 यसरी पारस्परिक अवरोध मार्फत तिनीहरूको संयुक्त प्रभावलाई कम गर्दछ।त्यसैगरी, टेमेफोसको संयोजन डायलिल डाइसल्फाइड, α-पाइनेन र लिमोनिनसँग सिनर्जीस्टिक भएको पाइयो, जसले जडिबुटी उत्पादनहरू र सिंथेटिक अर्गानोफोस्फेटहरू बीचको समन्वयात्मक प्रभावको अघिल्लो रिपोर्टहरूलाई समर्थन गर्दछ।
eudesmol र eucalyptol को संयोजनले एडिस एजिप्टाईको लार्भा र वयस्क चरणहरूमा एक समन्वयात्मक प्रभाव भएको पाइयो, सम्भवतः तिनीहरूको विभिन्न रासायनिक संरचनाहरूको कारणले गर्दा तिनीहरूको कार्यको विभिन्न मोडहरू।Eudesmol (a sesquiterpene) ले श्वासप्रश्वास प्रणाली 59 लाई असर गर्न सक्छ र eucalyptol (a monoterpene) ले acetylcholinesterase 60 लाई असर गर्न सक्छ।दुई वा बढी लक्षित साइटहरूमा सामग्रीहरूको सह-एक्सपोजरले संयोजनको समग्र घातक प्रभावलाई बढाउन सक्छ।वयस्क पदार्थ बायोअसेमा, म्यालाथियन कार्भोन वा युकलिप्टोल वा युकलिप्टोल वा डायलिल डाइसल्फाइड वा α-पाइनेनसँग सिनेर्जिस्टिक भएको पाइयो, यसले लिमोनेन र डिको थपमा सिनर्जिस्टिक भएको संकेत गर्दछ।एलिल ट्राइसल्फाइड बाहेक, टेर्पेन कम्पाउन्डहरूको सम्पूर्ण पोर्टफोलियोको लागि राम्रो सिनर्जीस्टिक एलेरसाइड उम्मेद्वारहरू।थाङ्गम र काथिरेसन61 ले पनि हर्बल अर्कहरूसँग म्यालाथियनको समन्वयात्मक प्रभावको समान परिणामहरू रिपोर्ट गरे।यो synergistic प्रतिक्रिया कीट detoxifying इन्जाइमहरु मा मालाथियन र phytochemicals को संयुक्त विषाक्त प्रभाव को कारण हुन सक्छ।म्यालाथियन जस्ता अर्गानोफोस्फेटहरूले सामान्यतया साइटोक्रोम P450 एस्टेरेस र मोनोअक्सिजेनेसहरू 62,63,64 लाई रोकेर कार्य गर्दछ।तसर्थ, म्यालाथियनलाई कारबाहीका यी मेकानिजमहरू र टर्पेन्सलाई विभिन्न कार्य संयन्त्रहरूसँग संयोजन गर्दा लामखुट्टेहरूमा समग्र घातक प्रभाव बढाउन सक्छ।
अर्कोतर्फ, प्रतिपक्षले चयन गरेको यौगिकहरू प्रत्येक यौगिकको तुलनामा संयोजनमा कम सक्रिय छन् भनी संकेत गर्दछ।केही संयोजनहरूमा विरोधको कारण यो हुन सक्छ कि एक यौगिकले अवशोषण, वितरण, चयापचय, वा उत्सर्जनको दर परिवर्तन गरेर अर्को यौगिकको व्यवहारलाई परिमार्जन गर्दछ।प्रारम्भिक अनुसन्धानकर्ताहरूले यसलाई औषधि संयोजनमा विरोधको कारण मानेका थिए।अणु सम्भावित संयन्त्र 65. त्यसैगरी, विरोधका सम्भावित कारणहरू समान रिसेप्टर वा लक्ष्य साइटको लागि समान कार्य संयन्त्र, घटक यौगिकहरूको प्रतिस्पर्धासँग सम्बन्धित हुन सक्छन्।केहि अवस्थामा, लक्ष्य प्रोटीन को गैर-प्रतिस्पर्धी अवरोध पनि हुन सक्छ।यस अध्ययनमा, दुई अर्गानोसल्फर यौगिकहरू, डायलिल डाइसल्फाइड र डायलिल ट्राइसल्फाइडले विरोधी प्रभावहरू देखाए, सम्भवतः एउटै लक्ष्य साइटको लागि प्रतिस्पर्धाको कारणले।त्यस्तै गरी, यी दुई सल्फर यौगिकहरूले विरोधी प्रभावहरू देखाए र eudesmol र α-pinene सँग जोड्दा कुनै प्रभाव थिएन।Eudesmol र alpha-pinene प्रकृतिमा चक्रीय छन्, जबकि diallyl disulfide र diallyl trisulfide प्रकृतिमा aliphatic छन्।रासायनिक संरचनाको आधारमा, यी यौगिकहरूको संयोजनले समग्र घातक गतिविधि बढाउनु पर्छ किनभने तिनीहरूको लक्षित साइटहरू सामान्यतया भिन्न हुन्छन् 34,47, तर प्रयोगात्मक रूपमा हामीले विरोध फेला पार्यौं, जुन vivo मा केही अज्ञात जीवहरूमा यी यौगिकहरूको भूमिकाको कारण हुन सक्छ।अन्तरक्रियाको परिणामको रूपमा प्रणालीहरू।त्यसै गरी, सिनेओल र α-pinene को संयोजनले विरोधी प्रतिक्रियाहरू उत्पादन गर्यो, यद्यपि शोधकर्ताहरूले पहिले रिपोर्ट गरे कि दुई यौगिकहरू कार्यको फरक लक्ष्यहरू छन् 47,60।दुबै यौगिकहरू चक्रीय मोनोटेरपेनहरू भएकाले, त्यहाँ केही साझा लक्ष्य साइटहरू हुन सक्छन् जसले बाँड्नका लागि प्रतिस्पर्धा गर्न सक्छ र अध्ययन गरिएको संयोजन जोडीहरूको समग्र विषाक्ततालाई प्रभाव पार्न सक्छ।
LC50 मानहरू र अवलोकन गरिएको मृत्युदरको आधारमा, दुई उत्कृष्ट सिनर्जिस्टिक टेर्पेन संयोजनहरू चयन गरिएका थिए, अर्थात् कार्भोन + लिमोनिन र युकेलिप्टोल + युडेमोलको जोडी, साथै टर्पेनेसको साथ सिंथेटिक अर्गानोफोस्फोरस म्यालाथियन।म्यालाथियोन + युडेस्मोल यौगिकहरूको इष्टतम समन्वयात्मक संयोजन वयस्क कीटनाशक बायोएसेमा परीक्षण गरिएको थियो।यी प्रभावकारी संयोजनहरूले अपेक्षाकृत ठूला एक्सपोजर ठाउँहरूमा ठूलो संख्यामा व्यक्तिहरू विरुद्ध काम गर्न सक्छन् कि छैनन् भनी पुष्टि गर्न ठूला कीट उपनिवेशहरूलाई लक्षित गर्नुहोस्।यी सबै संयोजनहरूले कीराहरूको ठूला झुण्डहरू विरुद्ध समन्वयात्मक प्रभाव देखाउँछन्।एडिस एजिप्टाई लार्भाको ठूलो जनसंख्या विरुद्ध परीक्षण गरिएको इष्टतम सिनेर्जिस्टिक लार्भिसिडल संयोजनको लागि समान परिणामहरू प्राप्त गरियो।तसर्थ, यो भन्न सकिन्छ कि बिरुवाको EO यौगिकहरूको प्रभावकारी सिनर्जीस्टिक लार्भिसाइडल र एडल्टिसाइडल संयोजन अवस्थित सिंथेटिक रसायनहरू विरुद्ध बलियो उम्मेद्वार हो र एडिस एजिप्टाई जनसंख्यालाई नियन्त्रण गर्न थप प्रयोग गर्न सकिन्छ।त्यसैगरी, लामखुट्टेलाई दिइने थाइमेटफोस वा म्यालाथियनको मात्रा कम गर्नका लागि सिंथेटिक लार्भिसाइड वा एडल्टिसाइडको टेर्पेनेसको प्रभावकारी संयोजन पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ।यी शक्तिशाली synergistic संयोजनहरूले एडिस लामखुट्टेमा लागूऔषध प्रतिरोधको विकासमा भविष्यका अध्ययनहरूको लागि समाधान प्रदान गर्न सक्छ।
एडिस एजिप्टाईका अण्डाहरू क्षेत्रीय चिकित्सा अनुसन्धान केन्द्र, डिब्रुगढ, इन्डियन काउन्सिल अफ मेडिकल रिसर्चबाट सङ्कलन गरी नियन्त्रित तापक्रम (28 ± 1 डिग्री सेल्सियस) र आर्द्रता (85 ± 5%) मा राखिएको थियो। निम्न सर्तहरू: Arivoli वर्णन गरिएको थियो et al।ह्याचिङ पछि, लार्भालाई लार्भा खाना (कुकुरको बिस्कुटको धुलो र खमीर ३:१ अनुपातमा) खुवाइयो र वयस्कहरूलाई १०% ग्लुकोजको घोल खुवाइयो।उदय भएको तेस्रो दिनदेखि, वयस्क पोथी लामखुट्टेहरूलाई अल्बिनो मुसाको रगत चुस्न अनुमति दिइयो।फिल्टर पेपरलाई गिलासमा पानीमा भिजाएर अण्डा दिने खोरमा राख्नुहोस्।
नीलगिरीका पातहरू (Myrtaceae), पवित्र तुलसी (Lamiaceae), पुदिना (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) र allium bulbs (Amaryllidaceae) जस्ता बिरुवाका नमूनाहरू चयन गरिएका छन्।गुवाहाटीबाट संकलन गरी गुवाहाटी विश्वविद्यालयको वनस्पति विज्ञान विभागले पहिचान गरेको हो।संकलन गरिएको बिरुवाको नमूनाहरू (500 ग्राम) 6 घण्टाको लागि क्लिभेन्जर उपकरण प्रयोग गरेर हाइड्रोडिस्टिलेसनको अधीनमा थिए।निकालिएको EO लाई सफा काँचको शीशीमा जम्मा गरी थप अध्ययनको लागि ४ डिग्री सेल्सियसमा भण्डारण गरिएको थियो।
लार्भिसिडल विषाक्तता थोरै परिमार्जित मानक विश्व स्वास्थ्य संगठन प्रक्रियाहरू 67 प्रयोग गरेर अध्ययन गरिएको थियो।DMSO लाई emulsifier को रूपमा प्रयोग गर्नुहोस्।प्रत्येक EO एकाग्रता प्रारम्भिक रूपमा 100 र 1000 पीपीएममा परीक्षण गरिएको थियो, प्रत्येक प्रतिकृतिमा 20 लार्भाहरू उजागर गर्दै।नतिजाहरूको आधारमा, एकाग्रता दायरा लागू गरिएको थियो र मृत्युदर 1 घण्टा देखि 6 घण्टा (1 घण्टा अन्तरालमा), र 24 घण्टा, 48 घण्टा र उपचार पछि 72 घण्टामा रेकर्ड गरिएको थियो।Sublethal एकाग्रता (LC50) एक्सपोजर को 24, 48 र 72 घण्टा पछि निर्धारित गरियो।प्रत्येक एकाग्रता एक नकारात्मक नियन्त्रण (पानी मात्र) र एक सकारात्मक नियन्त्रण (DMSO-उपचार गरिएको पानी) को साथ ट्रिपलिकेटमा परखिएको थियो।यदि प्युपेशन हुन्छ र नियन्त्रण समूहको लार्भाको 10% भन्दा बढी मर्छ भने, प्रयोग दोहोर्याइएको छ।यदि नियन्त्रण समूहमा मृत्यु दर 5-10% को बीचमा छ भने, Abbott सुधार सूत्र 68 प्रयोग गर्नुहोस्।
रामर एट अल द्वारा वर्णन गरिएको विधि।69 एडिस एजिप्टाई विरुद्ध एक वयस्क बायोएसे को लागी एसीटोन को विलायक को रूप मा प्रयोग गरीयो।प्रत्येक EO को प्रारम्भिक रूपमा 100 र 1000 ppm को सांद्रतामा वयस्क एडिस एजिप्टाई लामखुट्टे विरुद्ध परीक्षण गरिएको थियो।वाटम्यान नम्बरमा प्रत्येक तयार समाधानको 2 मिलीलीटर लागू गर्नुहोस्।फिल्टर पेपरको 1 टुक्रा (आकार 12 x 15 सेमी 2) र एसीटोनलाई 10 मिनेटको लागि वाष्पीकरण गर्न दिनुहोस्।फिल्टर पेपर मात्र 2 मिली एसीटोन संग उपचार एक नियन्त्रण को रूप मा प्रयोग गरिएको थियो।एसीटोन वाष्पीकरण भएपछि, उपचार गरिएको फिल्टर पेपर र नियन्त्रण फिल्टर पेपरलाई बेलनाकार ट्यूब (10 सेमी गहिरो) मा राखिन्छ।दस 3- देखि 4-दिन पुरानो गैर-रगत खुवाउने लामखुट्टेहरू प्रत्येक एकाग्रताको ट्रिपलिकेटमा स्थानान्तरण गरियो।प्रारम्भिक परीक्षणको नतिजाको आधारमा, चयन गरिएका तेलहरूको विभिन्न सांद्रताहरू परीक्षण गरियो।मृत्युदर १ घण्टा, २ घण्टा, ३ घण्टा, ४ घण्टा, ५ घण्टा, ६ घण्टा, २४ घण्टा, ४८ घण्टा र ७२ घण्टामा रेकर्ड गरिएको थियो ।24 घण्टा, 48 घण्टा र 72 घण्टाको एक्सपोजर समयको लागि LC50 मानहरू गणना गर्नुहोस्।यदि नियन्त्रण लटको मृत्यु दर 20% भन्दा बढी छ भने, सम्पूर्ण परीक्षण दोहोर्याउनुहोस्।त्यस्तै गरी, यदि नियन्त्रण समूहमा मृत्यु दर 5% भन्दा बढी छ भने, एबटको सूत्र 68 प्रयोग गरी उपचार गरिएका नमूनाहरूको लागि परिणामहरू समायोजन गर्नुहोस्।
ग्यास क्रोमेटोग्राफी (Agilent 7890A) र मास स्पेक्ट्रोमेट्री (Accu TOF GCv, Jeol) चयन गरिएको आवश्यक तेलहरूको घटक यौगिकहरू विश्लेषण गर्न प्रदर्शन गरिएको थियो।GC FID डिटेक्टर र एक केशिका स्तम्भ (HP5-MS) संग सुसज्जित थियो।वाहक ग्याँस हीलियम थियो, प्रवाह दर 1 एमएल / मिनेट थियो।GC कार्यक्रमले Allium sativum लाई 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M र Ocimum Sainttum लाई 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280 मा सेट गर्छ, पुदिना 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, eucalyptus 20.60-1M-10-200-3M-30-280 को लागि, र रातो को लागी एक हजार तहहरु को लागी तिनीहरू हुन्। 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M।
प्रत्येक EO को प्रमुख यौगिकहरू GC क्रोमेटोग्राम र मास स्पेक्ट्रोमेट्री नतिजाहरू (NIST 70 मानक डेटाबेसमा सन्दर्भ गरिएको) बाट गणना गरिएको क्षेत्र प्रतिशतको आधारमा पहिचान गरिएको थियो।
प्रत्येक EO मा दुई प्रमुख यौगिकहरू GC-MS नतिजाहरूको आधारमा चयन गरिएको थियो र थप बायोअसेहरूको लागि 98-99% शुद्धतामा Sigma-Aldrich बाट खरिद गरिएको थियो।यौगिकहरू माथि वर्णन गरिए अनुसार एडिस एजिप्टाई विरुद्ध लार्भिसाइडल र वयस्क प्रभावकारिताको लागि परीक्षण गरिएको थियो।सबैभन्दा सामान्य रूपमा प्रयोग हुने सिंथेटिक लार्भिसाइड टेमेफोसेट (सिग्मा एल्ड्रिच) र वयस्क औषधि म्यालाथियन (सिग्मा एल्ड्रिच) लाई एउटै प्रक्रिया पछ्याउँदै चयन गरिएको ईओ यौगिकहरूसँग तिनीहरूको प्रभावकारिता तुलना गर्न विश्लेषण गरिएको थियो।
चयन गरिएका टेर्पेन यौगिकहरू र टेर्पेन यौगिकहरू प्लस कमर्शियल अर्गानोफोस्फेटहरू (टाइलफोस र म्यालाथियन) को बाइनरी मिश्रणहरू प्रत्येक उम्मेदवार कम्पाउन्डको LC50 खुराकलाई १:१ अनुपातमा मिसाएर तयार पारिएको थियो।तयार संयोजनहरू माथि वर्णन गरिए अनुसार एडिस एजिप्टाईको लार्भा र वयस्क चरणहरूमा परीक्षण गरियो।प्रत्येक बायोएसे प्रत्येक संयोजनको लागि तीन प्रतिहरू र प्रत्येक संयोजनमा उपस्थित व्यक्तिगत यौगिकहरूको लागि तीन प्रतिहरूमा प्रदर्शन गरिएको थियो।लक्षित कीराहरूको मृत्यु 24 घण्टा पछि रेकर्ड गरिएको थियो।निम्न सूत्र प्रयोग गरेर बाइनरी मिश्रणको लागि अपेक्षित मृत्यु दर गणना गर्नुहोस्।
जहाँ E = बाइनरी संयोजनको प्रतिक्रियामा एडिस एजिप्टाई लामखुट्टेको अपेक्षित मृत्यु दर, अर्थात् जडान (A + B)।
प्रत्येक बाइनरी मिश्रणको प्रभावलाई Pavla52 द्वारा वर्णन गरिएको विधिद्वारा गणना गरिएको χ2 मानको आधारमा synergistic, antagonistic, वा कुनै प्रभावको रूपमा लेबल गरिएको थियो।निम्न सूत्र प्रयोग गरी प्रत्येक संयोजनको लागि χ2 मान गणना गर्नुहोस्।
संयोजनको प्रभावलाई synergistic को रूपमा परिभाषित गरिएको थियो जब गणना गरिएको χ2 मान स्वतन्त्रताको सम्बन्धित डिग्री (95% आत्मविश्वास अन्तराल) को लागि तालिका मान भन्दा ठूलो थियो र यदि पर्यवेक्षित मृत्युदर अपेक्षित मृत्युदर भन्दा बढि भेटियो।त्यसै गरी, यदि कुनै संयोजनको लागि गणना गरिएको χ2 मान स्वतन्त्रताको केही डिग्रीको साथ तालिका मूल्य भन्दा बढि छ, तर अवलोकन गरिएको मृत्युदर अपेक्षित मृत्युदरभन्दा कम छ भने, उपचारलाई विरोधी मानिन्छ।र यदि कुनै पनि संयोजनमा χ2 को गणना गरिएको मान स्वतन्त्रताको सम्बन्धित डिग्रीहरूमा तालिका मान भन्दा कम छ भने, संयोजनलाई कुनै प्रभाव नहुने मानिन्छ।
ठूलो संख्यामा कीराहरू विरुद्ध परीक्षणको लागि तीन देखि चार सम्भावित समन्वयात्मक संयोजनहरू (100 लार्भा र 50 लार्भिसिडल र वयस्क कीट गतिविधि) चयन गरिएको थियो।वयस्कहरू) माथिको रूपमा अगाडि बढ्नुहोस्।मिश्रणको साथसाथै, चयन गरिएका मिश्रणहरूमा उपस्थित व्यक्तिगत यौगिकहरू पनि एडिस एजिप्टाई लार्भा र वयस्कहरूको बराबर संख्यामा परीक्षण गरियो।संयोजन अनुपात एक उम्मेदवार कम्पाउन्डको एक भाग LC50 खुराक र अर्को घटक कम्पाउन्डको भाग LC50 खुराक हो।वयस्क गतिविधि बायोएसेमा, चयन गरिएका यौगिकहरू विलायक एसीटोनमा भंग गरियो र 1300 सेमी 3 बेलनाकार प्लास्टिक कन्टेनरमा बेरिएको फिल्टर पेपरमा लागू गरियो।एसीटोन १० मिनेटको लागि वाष्पीकरण भएको थियो र वयस्कहरूलाई रिहा गरियो।त्यसैगरी, लार्भिसिडल बायोएसेमा, LC50 क्यान्डीड कम्पाउन्डको डोज पहिले DMSO को बराबर मात्रामा घोलियो र त्यसपछि 1300 सीसी प्लाष्टिक कन्टेनरमा राखिएको १ लिटर पानीमा मिसाएर लार्भा छोडियो।
LC50 मानहरू गणना गर्न SPSS (संस्करण 16) र Minitab सफ्टवेयर प्रयोग गरेर 71 रेकर्ड गरिएको मृत्युदर डेटाको सम्भाव्य विश्लेषण गरिएको थियो।