फङ्गिसाइड सप्लिमेन्टेशनले एकान्त मेसन मौरीहरूमा खुद ऊर्जा लाभ र माइक्रोबायोम विविधता घटाउँछ।

Nature.com भ्रमण गर्नुभएकोमा धन्यवाद। तपाईंले प्रयोग गरिरहनुभएको ब्राउजरको संस्करणमा सीमित CSS समर्थन छ। उत्कृष्ट परिणामहरूको लागि, हामी तपाईंलाई आफ्नो ब्राउजरको नयाँ संस्करण प्रयोग गर्न सिफारिस गर्छौं (वा इन्टरनेट एक्सप्लोररमा अनुकूलता मोड असक्षम पार्नुहोस्)। यसैबीच, निरन्तर समर्थन सुनिश्चित गर्न, हामी स्टाइलिङ वा जाभास्क्रिप्ट बिना साइट प्रदर्शन गर्दैछौं।
रूखको फल फुल्ने समयमा प्रायः फङ्गिसाइडहरू प्रयोग गरिन्छ र यसले कीरा परागकणहरूलाई खतरामा पार्न सक्छ। यद्यपि, गैर-मौरी परागकणकर्ताहरू (जस्तै, एकान्त मौरी, ओस्मिया कोर्निफ्रन) ले फूल फुल्ने समयमा स्याउमा सामान्यतया प्रयोग हुने सम्पर्क र प्रणालीगत फङ्गिसाइडहरूलाई कसरी प्रतिक्रिया दिन्छन् भन्ने बारेमा थोरै मात्र थाहा छ। यो ज्ञानको अन्तरले सुरक्षित सांद्रता र फङ्गिसाइड छर्कने समय निर्धारण गर्ने नियामक निर्णयहरूलाई सीमित गर्दछ। हामीले दुई सम्पर्क फङ्गिसाइडहरू (क्याप्टान र म्यान्कोजेब) र चार इन्टरलेयर/फाइटोसिस्टम फङ्गिसाइडहरू (साइप्रोसाइक्लिन, माइक्लोबुटानिल, पाइरोस्ट्रोबिन र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन) को प्रभावहरूको मूल्याङ्कन गर्यौं। लार्भाको तौल वृद्धि, अस्तित्व, लिङ्ग अनुपात र ब्याक्टेरियाको विविधतामा प्रभावहरू। मूल्याङ्कन एक पुरानो मौखिक बायोसे प्रयोग गरेर गरिएको थियो जसमा परागकणलाई हालको क्षेत्र प्रयोगको लागि सिफारिस गरिएको खुराक (१X), आधा खुराक (०.५X) र कम खुराक (०.१X) को आधारमा तीन खुराकहरूमा उपचार गरिएको थियो। म्यान्कोजेब र पाइरिटोसिनका सबै खुराकहरूले शरीरको तौल र लार्भाको अस्तित्वलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गर्यो। त्यसपछि हामीले १६S जीनलाई अनुक्रमित गर्यौं जसले गर्दा म्यान्कोजेबको लार्भा ब्याक्टेरियोम सबैभन्दा बढी मृत्युदरको लागि जिम्मेवार हुन्छ। हामीले पत्ता लगायौं कि म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको परागकणमा खुवाइएका लार्भाहरूमा ब्याक्टेरियाको विविधता र प्रशस्तता उल्लेखनीय रूपमा कम भएको थियो। हाम्रो प्रयोगशालाको नतिजाले फूल फुल्ने समयमा यी केही फङ्गिसाइडहरू छर्कनु विशेष गरी ओ. कोर्निफ्रनको स्वास्थ्यको लागि हानिकारक हुन्छ भन्ने संकेत गर्छ। यो जानकारी फलफूलका रूख संरक्षण उत्पादनहरूको दिगो प्रयोग सम्बन्धी भविष्यका व्यवस्थापन निर्णयहरूको लागि सान्दर्भिक छ र परागकणहरूलाई सुरक्षित राख्ने उद्देश्यले नियामक प्रक्रियाहरूको लागि आधारको रूपमा काम गर्दछ।
एकान्त मेसन मौरी ओस्मिया कोर्निफ्रन (हाइमेनोप्टेरा: मेगाचिलिडे) १९७० को दशकको अन्त्य र १९८० को दशकको सुरुवातमा जापानबाट संयुक्त राज्य अमेरिकामा ल्याइयो, र त्यसबेलादेखि नै यो प्रजातिले व्यवस्थित पारिस्थितिक प्रणालीमा महत्त्वपूर्ण परागकण भूमिका खेलेको छ। यस मौरीको प्राकृतिक जनसंख्या लगभग ५० प्रजातिका जंगली मौरीहरूको भाग हो जसले संयुक्त राज्य अमेरिकामा बदाम र स्याउको बगैंचामा परागकण गर्ने मौरीहरूलाई पूरक बनाउँछ। मेसन मौरीहरूले धेरै चुनौतीहरूको सामना गर्छन्, जसमा बासस्थानको खण्डीकरण, रोगजनकहरू र कीटनाशकहरू समावेश छन्। कीटनाशकहरू मध्ये, फङ्गिसाइडहरूले ऊर्जा प्राप्ति, चारा खोज्ने क्षमता घटाउँछन् र शरीरको अवस्था ६,७ कम गर्छन्। यद्यपि हालैको अनुसन्धानले मेसन मौरीको स्वास्थ्यमा प्रत्यक्ष रूपमा कमेन्सल र एक्टोब्याक्टिक सूक्ष्मजीवहरूबाट प्रभावित हुने सुझाव दिन्छ, ८,९ किनभने ब्याक्टेरिया र फङ्गाले पोषण र प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाहरूलाई प्रभाव पार्न सक्छ, मेसन मौरीको माइक्रोबियल विविधतामा फङ्गिसाइड एक्सपोजरको प्रभावहरू भर्खरै अध्ययन गर्न थालेको छ।
फूल फुल्नु अघि र फूल फुल्ने समयमा विभिन्न प्रभाव पार्ने (सम्पर्क र प्रणालीगत) फङ्गिसाइडहरू (सम्पर्क र प्रणालीगत) छर्किन्छन् जसले स्याउको खपटा, तितो सड, खैरो सड र पाउडररी फफूंदी जस्ता रोगहरूको उपचार गर्दछ। फङ्गिसाइडहरू परागकणकर्ताहरूको लागि हानिकारक मानिन्छन्, त्यसैले फूल फुल्ने अवधिमा मालीहरूलाई सिफारिस गरिन्छ; मौरीहरूले यी फङ्गिसाइडहरूको सम्पर्क र सेवन अपेक्षाकृत रूपमा राम्रोसँग ज्ञात छ, किनकि यो अमेरिकी वातावरण संरक्षण एजेन्सी र धेरै अन्य राष्ट्रिय नियामक एजेन्सीहरू द्वारा कीटनाशक दर्ता प्रक्रियाको एक भाग हो। १२,१३,१४। यद्यपि, गैर-मौरीहरूमा फङ्गिसाइडहरूको प्रभाव कम ज्ञात छ किनभने तिनीहरू संयुक्त राज्य अमेरिकामा मार्केटिङ प्राधिकरण सम्झौताहरू अन्तर्गत आवश्यक छैनन्। थप रूपमा, एकल मौरीहरूको परीक्षणको लागि सामान्यतया कुनै मानकीकृत प्रोटोकलहरू छैनन्16,17, र परीक्षणको लागि मौरीहरू प्रदान गर्ने उपनिवेशहरू कायम राख्नु चुनौतीपूर्ण छ18। जंगली मौरीहरूमा कीटनाशकहरूको प्रभाव अध्ययन गर्न युरोप र संयुक्त राज्य अमेरिकामा विभिन्न व्यवस्थित मौरीहरूको परीक्षणहरू बढ्दो रूपमा सञ्चालन भइरहेका छन्, र हालै O. cornifrons19 को लागि मानकीकृत प्रोटोकलहरू विकास गरिएको छ।
सिङ भएका मौरीहरू मोनोसाइटहरू हुन् र कार्प बालीहरूमा मह मौरीको पूरक वा प्रतिस्थापनको रूपमा व्यावसायिक रूपमा प्रयोग गरिन्छ। यी मौरीहरू मार्च र अप्रिलको बीचमा निस्कन्छन्, जसमा अकालमा भालेहरू पोथीहरू भन्दा तीन देखि चार दिन अघि निस्कन्छन्। संभोग पछि, पोथीले सक्रिय रूपमा परागकण र अमृत सङ्कलन गर्छिन् जसले गर्दा ट्युबुलर गुँड गुहा (प्राकृतिक वा कृत्रिम) भित्र ब्रूड कोषहरूको श्रृंखला प्रदान हुन्छ। अण्डाहरू कोषहरू भित्र परागकणमा राखिन्छन्; त्यसपछि पोथीले अर्को कोष तयार गर्नु अघि माटोको पर्खाल बनाउँछिन्। पहिलो इन्स्टार लार्भा कोरियनमा बन्द हुन्छन् र भ्रूण तरल पदार्थ खान्छन्। दोस्रो देखि पाँचौं इन्स्टार (प्रीपुपा) सम्म, लार्भाले परागकण खान्छन्22। परागकण आपूर्ति पूर्ण रूपमा समाप्त भएपछि, लार्भाले कोकुन बनाउँछ, प्युपेट गर्छ र एउटै ब्रूड चेम्बरमा वयस्कको रूपमा निस्कन्छ, सामान्यतया गर्मीको अन्त्यमा20,23। वयस्कहरू अर्को वसन्तमा निस्कन्छन्। वयस्कहरूको अस्तित्व खाना सेवनको आधारमा शुद्ध ऊर्जा वृद्धि (तौल वृद्धि) सँग सम्बन्धित छ। यसरी, परागकणको पोषण गुणस्तर, साथै मौसम वा कीटनाशकहरूको सम्पर्क जस्ता अन्य कारकहरू बाँच्न र स्वास्थ्यको निर्धारक हुन्24।
फूल फुल्नुअघि प्रयोग गरिने कीटनाशक र फङ्गिसाइडहरू बिरुवाको भास्कुलेचर भित्र फरक-फरक मात्रामा सर्छन्, ट्रान्सलामिनर (जस्तै, पातको माथिल्लो सतहबाट तल्लो सतहमा, केही फङ्गिसाइडहरू जस्तै) २५ देखि साँच्चै प्रणालीगत प्रभावहरू सम्म। , जुन जराबाट क्राउनमा प्रवेश गर्न सक्छ, स्याउको फूलको अमृतमा प्रवेश गर्न सक्छ २६, जहाँ तिनीहरूले वयस्क O. cornifrons२७ मार्न सक्छन्। केही कीटनाशकहरूले परागकणमा पनि चुहिन्छन्, जसले मकैको लार्भाको विकासलाई असर गर्छ र तिनीहरूको मृत्यु निम्त्याउँछ १९। अन्य अध्ययनहरूले देखाएका छन् कि केही फङ्गिसाइडहरूले सम्बन्धित प्रजाति O. lignaria२८ को गुँड बनाउने व्यवहारलाई उल्लेखनीय रूपमा परिवर्तन गर्न सक्छन्। थप रूपमा, कीटनाशक एक्सपोजर परिदृश्यहरू (फङ्गिसाइडहरू सहित) अनुकरण गर्ने प्रयोगशाला र क्षेत्र अध्ययनहरूले देखाएका छन् कि कीटनाशकहरूले मह मौरी र केही एकान्त मौरीहरूको शरीर विज्ञान २२ आकार विज्ञान २९ र अस्तित्वलाई नकारात्मक रूपमा असर गर्छ। फूल फुल्ने समयमा खुला फूलहरूमा सिधै लागू गरिएका विभिन्न फङ्गिसाइडल स्प्रेहरूले लार्भा विकासको लागि वयस्कहरूले सङ्कलन गरेको परागकणलाई दूषित गर्न सक्छन्, जसको प्रभाव अध्ययन गर्न बाँकी छ ३०।
लार्भाको विकास परागकण र पाचन प्रणालीको सूक्ष्मजीव समुदायबाट प्रभावित हुन्छ भन्ने कुरा बढ्दो रूपमा मान्यता प्राप्त भएको छ। मौरीको माइक्रोबायोमले ​​शरीरको भार ३१, चयापचय परिवर्तन २२ र रोगजनकहरूको संवेदनशीलता ३२ जस्ता प्यारामिटरहरूलाई प्रभाव पार्छ। अघिल्ला अध्ययनहरूले एकान्त मौरीको माइक्रोबायोममा विकास चरण, पोषक तत्व र वातावरणको प्रभावको जाँच गरेका छन्। यी अध्ययनहरूले लार्भा र परागकण माइक्रोबायोम ३३ को संरचना र प्रशस्ततामा समानताहरू, साथै एकान्त मौरी प्रजातिहरूमा सबैभन्दा सामान्य ब्याक्टेरिया जेनेरा स्यूडोमोनास र डेल्फिया प्रकट गरे। यद्यपि, फङ्गिसाइडहरू मौरीको स्वास्थ्यको रक्षा गर्ने रणनीतिहरूसँग सम्बन्धित भए तापनि, प्रत्यक्ष मौखिक सम्पर्क मार्फत लार्भा माइक्रोबायोटामा फङ्गिसाइडहरूको प्रभावहरू अझै पनि अनौठा छन्।
यस अध्ययनले संयुक्त राज्य अमेरिकामा रूखको फलमा प्रयोगको लागि दर्ता गरिएका छवटा सामान्य रूपमा प्रयोग हुने फङ्गिसाइडहरूको वास्तविक-विश्व खुराकहरूको प्रभावहरूको परीक्षण गर्‍यो, जसमा दूषित खानाबाट मकैको हर्नवर्म मोथ लार्भालाई मौखिक रूपमा दिइने सम्पर्क र प्रणालीगत फङ्गिसाइडहरू समावेश छन्। हामीले पत्ता लगायौं कि सम्पर्क र प्रणालीगत फङ्गिसाइडहरूले मौरीको शरीरको तौल वृद्धि र मृत्युदर बढायो, जसमा म्यान्कोजेब र पाइरिथियोपाइडसँग सम्बन्धित सबैभन्दा गम्भीर प्रभावहरू थिए। त्यसपछि हामीले म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको परागकण आहारमा खुवाइएको लार्भाको सूक्ष्मजीव विविधतालाई नियन्त्रण आहारमा खुवाइएकोहरूसँग तुलना गर्यौं। हामी एकीकृत कीट र परागकण व्यवस्थापन (IPPM)36 कार्यक्रमहरूको लागि मृत्युदर र प्रभावहरू अन्तर्निहित सम्भावित संयन्त्रहरू बारे छलफल गर्छौं।
कोकुनमा जाडो बिताउने वयस्क ओ. कोर्निफ्रनहरू बिग्लरभिल, पेन्सिलभेनियाको फलफूल अनुसन्धान केन्द्रबाट प्राप्त गरिएको थियो र −३ देखि २°C (±०.३°C) मा भण्डारण गरिएको थियो। प्रयोग अघि (कुल ६०० कोकुन)। मे २०२२ मा, १०० ओ. कोर्निफ्रन कोकुनहरू दैनिक प्लास्टिक कपमा स्थानान्तरण गरिएको थियो (प्रति कप ५० कोकुन, DI ५ सेमी × १५ सेमी लामो) र कप भित्र वाइपहरू राखिएका थिए जसले गर्दा खोल्न र चपाउन मिल्ने सब्सट्रेट प्रदान गर्न, ढुङ्गे मौरीहरूमा तनाव कम हुन्छ। कोकुनहरू भएको दुई प्लास्टिक कपहरू किराको पिंजडामा (३० × ३० × ३० सेमी, बगडोर्म मेगाभ्यू साइन्स कम्पनी लिमिटेड, ताइवान) १० मिलीलीटर फिडरहरू सहित ५०% सुक्रोज घोल भएको राख्नुहोस् र बन्द र मिलन सुनिश्चित गर्न चार दिनसम्म भण्डारण गर्नुहोस्। २३°C, सापेक्षिक आर्द्रता ६०%, फोटोपिरियड १० लिटर (कम तीव्रता): १४ दिन। स्याउको फूल फुल्ने समयमा (पापको गुँड: चौडाइ ३३.६६ × उचाइ ३०.४८ × लम्बाइ ४६.९९ सेन्टिमिटर; पूरक चित्र १) छ दिनसम्म (प्रति दिन १००) सम्म हरेक बिहान १०० जना मिलेर बनाइएका पोथी र भालेहरूलाई दुई कृत्रिम गुँडमा छोडियो। पेन्सिलभेनिया राज्य अर्बोरेटममा चेरी नजिकै राखिएको (प्रुनस सेरासस 'युब्याङ्क' स्वीट चेरी पाई™), आरु (प्रुनस पर्सिका 'कन्टेन्डर'), प्रुनस पर्सिका 'PF 27A' फ्लेमिन फ्युरी®), नाशपाती (पाइरस पेरिफोलिया 'ओलम्पिक', पाइरस पेरिफोलिया 'शिन्को', पाइरस पेरिफोलिया 'शिन्सेकी'), कोरोनारिया एप्पल ट्री (मालुस कोरोनारिया) र स्याउका रूखका असंख्य प्रकारहरू (मालुस कोरोनारिया, मालुस), घरेलु स्याउको रूख 'को-अप ३०′ इन्टरप्राइज™, मालुस एप्पल ट्री 'को-अप ३१′ वाइनक्रिस्प™, बेगोनिया 'फ्रीडम', बेगोनिया 'गोल्डेन डेलिसियस', बेगोनिया 'नोभा स्पाई')। प्रत्येक नीलो प्लास्टिकको चराको घर दुई काठको बक्सको माथि फिट हुन्छ। प्रत्येक नेस्ट बक्समा ८०० वटा खाली क्राफ्ट पेपर ट्यूबहरू थिए (सर्पिल खुला, ०.८ सेमी ID × १५ सेमी L) (जोन्सभिल पेपर ट्यूब कं, मिशिगन) अपारदर्शी सेलोफेन ट्यूबहरूमा घुसाइएका थिए (०.७ OD हेर्नुहोस् प्लास्टिक प्लगहरू (T-1X प्लगहरू) ले नेस्टिङ साइटहरू प्रदान गर्दछ।
दुबै गुँड बाकसहरू पूर्वतिर फर्किएका थिए र मुसा र चराहरूको पहुँच रोक्नको लागि हरियो प्लास्टिकको बगैंचाको बार (एभरबिल्ट मोडेल #८८९२५०EB१२, खोल्ने आकार ५ × ५ सेमी, ०.९५ मिटर × १०० मिटर) ले ढाकिएको थियो र गुँड बाकसको छेउमा माटोको सतहमा राखिएको थियो। गुँड बाकस (पूरक चित्र १क)। गुँडबाट ३० वटा ट्यूबहरू सङ्कलन गरेर प्रयोगशालामा ढुवानी गरेर मकै बोररको अण्डा दैनिक सङ्कलन गरिएको थियो। कैंची प्रयोग गरेर, ट्यूबको अन्त्यमा काट्नुहोस्, त्यसपछि ब्रूड कोषहरू पर्दाफास गर्न सर्पिल ट्यूबलाई छुट्याउनुहोस्। व्यक्तिगत अण्डा र तिनीहरूको परागकण घुमाउरो स्प्याटुला (माइक्रोस्लाइड उपकरण किट, बायोक्विप उत्पादन इंक, क्यालिफोर्निया) प्रयोग गरेर हटाइयो। अण्डाहरूलाई ओसिलो फिल्टर पेपरमा इन्क्युबेट गरिएको थियो र हाम्रो प्रयोगहरूमा प्रयोग गर्नु अघि २ घण्टाको लागि पेट्री डिशमा राखिएको थियो (पूरक चित्र १ख-घ)।
प्रयोगशालामा, हामीले स्याउ फुल्नु अघि र फुल्ने क्रममा प्रयोग गरिएका छवटा फङ्गिसाइडहरूको मौखिक विषाक्तताको मूल्याङ्कन तीन सांद्रतामा गर्यौं (०.१X, ०.५X, र १X, जहाँ १X प्रति १०० ग्यालन पानी/एकरमा लागू गरिएको चिन्ह हो। उच्च फिल्ड डोज = खेतमा सांद्रता)। , तालिका १)। प्रत्येक सांद्रता १६ पटक दोहोर्याइएको थियो (n = १६)। दुई सम्पर्क फङ्गिसाइडहरू (तालिका S1: म्यानकोजेब २६९६.१४ पीपीएम र क्याप्टान २८७५.८८ पीपीएम) र चार प्रणालीगत फङ्गिसाइडहरू (तालिका S1: पाइरिथियोस्ट्रोबिन २५०.१४ पीपीएम; ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन ११०.०६ पीपीएम; माइक्लोबुटानिल एजोल ७५.१२ पीपीएम; साइप्रोडिनिल २८०.८४५ पीपीएम) फलफूल, तरकारी र सजावटी बालीहरूमा विषाक्तता। हामीले ग्राइन्डर प्रयोग गरेर परागकणलाई एकरूप बनायौं, ०.२० ग्राम इनार (२४-वेल फाल्कन प्लेट) मा स्थानान्तरण गर्यौं, र १ μL फङ्गिसाइड घोल थपेर १ मिमी गहिरो इनारमा पिरामिडल परागकण बनायौं जसमा अण्डाहरू राखिएका थिए। मिनी स्प्याटुला प्रयोग गरेर राख्नुहोस् (पूरक चित्र १c,d)। फाल्कन प्लेटहरू कोठाको तापक्रम (२५°C) र ७०% सापेक्षिक आर्द्रतामा भण्डारण गरिएका थिए। हामीले तिनीहरूलाई शुद्ध पानीले उपचार गरिएको एकसमान परागकण आहार खुवाइएको नियन्त्रण लार्भासँग तुलना गर्यौं। हामीले विश्लेषणात्मक सन्तुलन प्रयोग गरेर लार्भा प्रिपुपल उमेरमा नपुगुन्जेल मृत्युदर रेकर्ड गर्यौं र लार्भाको तौल प्रत्येक अर्को दिन मापन गर्यौं (फिशर साइन्टिफिक, शुद्धता = ०.०००१ ग्राम)। अन्तमा, २.५ महिना पछि कोकुन खोलेर लिङ्ग अनुपातको मूल्याङ्कन गरियो।
सम्पूर्ण O. cornifrons लार्भाबाट DNA निकालिएको थियो (प्रति उपचार अवस्था n = 3, mancozeb-उपचार गरिएको र उपचार नगरिएको परागकण) र हामीले यी नमूनाहरूमा माइक्रोबियल विविधता विश्लेषणहरू गर्यौं, विशेष गरी किनभने mancozeb मा लार्भामा सबैभन्दा बढी मृत्युदर देखिएको थियो। MnZn प्राप्त गर्दै। DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA किट (Zymo Research, Irvine, CA) प्रयोग गरेर DNA लाई प्रवर्द्धन गरिएको थियो, शुद्ध गरिएको थियो, र v3 किट प्रयोग गरेर Illumina® MiSeq™ मा अनुक्रमित (600 चक्र) गरिएको थियो। 16S rRNA जीनको V3-V4 क्षेत्रलाई लक्षित गर्ने प्राइमरहरू प्रयोग गरेर Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) प्रयोग गरेर ब्याक्टेरिया 16S राइबोसोमल RNA जीनहरूको लक्षित अनुक्रमण गरिएको थियो। थप रूपमा, 10% PhiX समावेश प्रयोग गरेर 18S अनुक्रमण गरिएको थियो, र प्राइमर जोडी 18S001 र NS4 प्रयोग गरेर प्रवर्द्धन गरिएको थियो।
QIIME2 पाइपलाइन (v2022.11.1) प्रयोग गरेर जोडी गरिएका पठनहरू 39 आयात र प्रशोधन गर्नुहोस्। यी पठनहरू ट्रिम र मर्ज गरिएका थिए, र QIIME2 (qiime dada2 noise pairing)40 मा DADA2 प्लगइन प्रयोग गरेर काइमेरिक अनुक्रमहरू हटाइएका थिए। 16S र 18S कक्षा असाइनमेन्टहरू वस्तु वर्गीकरणकर्ता प्लगइन Classify-sklearn र पूर्व-प्रशिक्षित आर्टिफ्याक्ट silva-138-99-nb-classifier प्रयोग गरेर प्रदर्शन गरिएको थियो।
सबै प्रयोगात्मक डेटा सामान्यता (शापिरो-विल्क्स) र भिन्नताहरूको एकरूपता (लेभेनको परीक्षण) को लागि जाँच गरियो। डेटा सेटले प्यारामेट्रिक विश्लेषणको धारणाहरू पूरा नगरेको र रूपान्तरणले अवशेषहरूलाई मानकीकृत गर्न असफल भएकोले, हामीले लार्भाको ताजा तौलमा उपचारको प्रभावको मूल्याङ्कन गर्न दुई कारकहरू [समय (तीन-चरण २, ५, र ८ दिनको समय बिन्दुहरू) र फङ्गिसाइड] सहितको गैर-प्यारामेट्रिक दुई-तर्फी ANOVA (क्रस्कल-वालिस) प्रदर्शन गर्यौं, त्यसपछि विल्कोक्सन परीक्षण प्रयोग गरेर पोस्ट हक ननप्यारामेट्रिक जोडीवार तुलनाहरू गरियो। हामीले तीन फङ्गिसाइड सांद्रताहरूमा बाँच्नको लागि फङ्गिसाइडहरूको प्रभावहरूको तुलना गर्न पोइसन वितरणको साथ सामान्यीकृत रेखीय मोडेल (GLM) प्रयोग गर्यौं41,42। भिन्न प्रचुरता विश्लेषणको लागि, एम्प्लिकन अनुक्रम भेरियन्टहरू (ASVs) को संख्या जीनस स्तरमा संकुचित गरिएको थियो। १६S (जीनस स्तर) र १८S सापेक्षिक प्रशस्तता प्रयोग गर्ने समूहहरू बीचको भिन्नता प्रशस्तताको तुलना स्थिति, स्केल, र आकार (GAMLSS) को लागि बीटा शून्य-फुलाइएको (BEZI) परिवार वितरणको लागि सामान्यीकृत additive मोडेल प्रयोग गरेर गरिएको थियो, जुन माइक्रोबायोम R43 (v1.1) मा म्याक्रोमा मोडेल गरिएको थियो। १)। भिन्नता विश्लेषण गर्नु अघि माइटोकोन्ड्रियल र क्लोरोप्लास्ट प्रजातिहरू हटाउनुहोस्। १८S को फरक वर्गीकरण स्तरहरूको कारणले गर्दा, भिन्नता विश्लेषणको लागि प्रत्येक वर्गीकरणको सबैभन्दा कम स्तर मात्र प्रयोग गरिएको थियो। सबै सांख्यिकीय विश्लेषणहरू R (v. 3.4.3., CRAN परियोजना) (टीम २०१३) प्रयोग गरेर गरिएको थियो।
म्यान्कोजेब, पाइरिथियोस्ट्रोबिन र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिनको सम्पर्कले ओ. कोर्निफ्रनमा शरीरको तौल वृद्धिलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गर्‍यो (चित्र १)। यी प्रभावहरू मूल्याङ्कन गरिएका तीनवटै खुराकहरूको लागि निरन्तर रूपमा अवलोकन गरिएको थियो (चित्र १क–ग)। साइक्लोस्ट्रोबिन र माइक्लोबुटानिलले लार्भाको तौल उल्लेखनीय रूपमा घटाएनन्।
चार आहार उपचार (एकरूप परागकण खुवाउने + फङ्गिसाइड: नियन्त्रण, ०.१X, ०.५X र १X खुराक) अन्तर्गत तीन समय बिन्दुमा मापन गरिएको स्टेम बोरर लार्भाको औसत ताजा तौल। (क) कम खुराक (०.१X): पहिलो समय बिन्दु (दिन १): χ२: ३०.९९, DF = ६; P < ०.०००१, दोस्रो समय बिन्दु (दिन ५): २२.८३, DF = ०.०००९; तेस्रो पटक; बिन्दु (दिन ८): χ२: २८.३९, DF = ६; (ख) आधा खुराक (०.५X): पहिलो समय बिन्दु (दिन १): χ२: ३५.६७, DF = ६; P < ०.०००१, दोस्रो समय बिन्दु (दिन पहिलो)। ): χ२: १५.९८, DF = ६; P = ०.००९०; तेस्रो समय बिन्दु (दिन ८) χ२: १६.४७, DF = ६; (c) साइट वा पूर्ण खुराक (१X): पहिलो समय बिन्दु (दिन १) χ२: २०.६४, P = ६; P = ०.०३२६, दोस्रो समय बिन्दु (दिन ५): χ२: २२.८३, DF = ६; P = ०.०००९; तेस्रो समय बिन्दु (दिन ८): χ२: २८.३९, DF = ६; भिन्नताको गैर-प्यारामेट्रिक विश्लेषण। बारहरूले जोडीवार तुलनाको औसत ± SE प्रतिनिधित्व गर्दछ (α = ०.०५) (n = १६) *P ≤ ०.०५, **P ≤ ०.००१, ***P ≤ ०.०००१।
सबैभन्दा कम मात्रा (०.१ गुणा) मा, ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिनले लार्भाको शरीरको तौल ६०%, म्यान्कोजेबले ४९%, माइक्लोब्युटानिलले ४८%, र पाइरिथिस्ट्रोबिनले ४६% ले घट्यो (चित्र १क)। आधा फिल्ड डोज (०.५ गुणा) मा पर्दा, म्यान्कोजेब लार्भाको शरीरको तौल ८६%, पाइरिथियोस्ट्रोबिन ५२% र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन ५०% ले घट्यो (चित्र १ख)। म्यान्कोजेबको पूर्ण फिल्ड डोज (१ गुणा) ले लार्भाको तौल ८२%, पाइरिथियोस्ट्रोबिन ७०% र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन, माइक्लोब्युटानिल र स्याङ्गार्ड लगभग ३०% ले घट्यो (चित्र १ग)।
लार्भाले म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको परागकण खुवाएकोमा मृत्युदर सबैभन्दा बढी थियो, त्यसपछि पाइरिथियोस्ट्रोबिन र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन थिए। म्यान्कोजेब र पाइरिटिसोलिनको बढ्दो मात्रासँगै मृत्युदर बढ्यो (चित्र २; तालिका २)। यद्यपि, ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिनको सांद्रता बढ्दै जाँदा मकै बोररको मृत्युदर थोरै मात्र बढ्यो; नियन्त्रण उपचारको तुलनामा साइप्रोडिनिल र क्याप्टानले मृत्युदरमा उल्लेखनीय वृद्धि गरेनन्।
छ वटा फरक-फरक फङ्गिसाइडले व्यक्तिगत रूपमा उपचार गरिएको परागकण सेवन गरेपछि बोरर फ्लाई लार्भाको मृत्युदर तुलना गरिएको थियो। म्यान्कोजेब र पेन्टोपिरामाइड मकैको किराको मौखिक सम्पर्कमा बढी संवेदनशील थिए (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (रेखा, ढलान = 0.29, P < 0.001; ढलान = 0.24, P < 0.00))।
औसतमा, सबै उपचारहरूमा, ३९.०५% बिरामीहरू महिला र ६०.९५% पुरुष थिए। नियन्त्रण उपचारहरूमा, कम-डोज (०.१X) र आधा-डोज (०.५X) अध्ययनहरूमा महिलाहरूको अनुपात ४०% थियो, र क्षेत्र-डोज (१X) अध्ययनहरूमा ३०% थियो। ०.१X खुराकमा, म्यान्कोजेब र माइक्लोबुटानिलले उपचार गरिएको परागकण खुवाइएको लार्भाहरूमा, ३३.३३% वयस्कहरू महिला थिए, २२% वयस्कहरू पोथी थिए, ४४% वयस्क लार्भा पोथी थिए, ४४% वयस्क लार्भा पोथी थिए। पोथी, ४१% वयस्क लार्भा पोथी थिए, र नियन्त्रणहरू ३१% थिए (चित्र ३क)। ०.५ गुणा मात्रामा, म्यान्कोजेब र पाइरिथियोस्ट्रोबिन समूहमा वयस्क किराहरूको ३३% महिला, ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन समूहमा ३६%, माइक्लोबुटानिल समूहमा ४१% र साइप्रोस्ट्रोबिन समूहमा ४६% थिए। यो संख्या समूहमा ५३% थियो। क्याप्टन समूहमा र नियन्त्रण समूहमा ३८% (चित्र ३ख)। १X खुराकमा, म्यान्कोजेब समूहको ३०% महिला, पाइरिथियोस्ट्रोबिन समूहको ३६%, ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन समूहको ४४%, माइक्लोबुटानिल समूहको ३८%, नियन्त्रण समूहको ५०% महिला थिए - ३८.५% (चित्र ३ग)।
लार्भा अवस्थाको फङ्गिसाइडको सम्पर्क पछि पोथी र भाले बोररहरूको प्रतिशत। (क) कम मात्रा (०.१ गुणा)। (ख) आधा मात्रा (०.५ गुणा)। (ग) खेतको मात्रा वा पूर्ण मात्रा (१ गुणा)।
१६S अनुक्रम विश्लेषणले ब्याक्टेरिया समूहलाई म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको परागकणले खुवाइएको लार्भा र उपचार नगरिएको परागकणले खुवाइएको लार्भा बीच फरक देखाएको छ (चित्र ४क)। परागकणमा खुवाइएको उपचार नगरिएको लार्भाको माइक्रोबियल इन्डेक्स म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको परागकणमा खुवाइएको लार्भाको भन्दा बढी थियो (चित्र ४ख)। समूहहरू बीचको समृद्धिमा अवलोकन गरिएको भिन्नता सांख्यिकीय रूपमा महत्त्वपूर्ण नभए पनि, यो उपचार नगरिएको परागकणमा खुवाइएको लार्भाको लागि अवलोकन गरिएको भन्दा उल्लेखनीय रूपमा कम थियो (चित्र ४ग)। सापेक्षिक प्रशस्तताले देखायो कि नियन्त्रण परागकणमा खुवाइएको लार्भाको माइक्रोबायोटा म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको लार्भामा खुवाइएको लार्भाको भन्दा बढी विविध थियो (चित्र ५क)। वर्णनात्मक विश्लेषणले नियन्त्रण र म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको नमूनाहरूमा २८ जेनेराको उपस्थिति प्रकट गर्‍यो (चित्र ५ख)। c १८S अनुक्रमण प्रयोग गरेर विश्लेषण गर्दा कुनै महत्त्वपूर्ण भिन्नता देखा परेन (पूरक चित्र २)।
१६S अनुक्रमहरूमा आधारित SAV प्रोफाइलहरूलाई श्यानन रिचनेससँग तुलना गरिएको थियो र फाइलम स्तरमा अवलोकन गरिएको रिचनेस देखाइएको थियो। (क) उपचार नगरिएको पराग-पोषित वा नियन्त्रण (नीलो) र म्यान्कोजेब-पोषित लार्भा (सुन्तला) मा समग्र माइक्रोबियल समुदाय संरचनामा आधारित प्रमुख समन्वय विश्लेषण (PCoA)। प्रत्येक डेटा बिन्दुले छुट्टै नमूना प्रतिनिधित्व गर्दछ। बहुभिन्न t वितरणको Bray-Curtis दूरी प्रयोग गरेर PCoA गणना गरिएको थियो। अंडाकारहरूले ८०% विश्वास स्तर प्रतिनिधित्व गर्दछ। (ख) Boxplot, कच्चा Shannon सम्पत्ति डेटा (बिन्दुहरू) र c। अवलोकनयोग्य सम्पत्ति। Boxplots ले मध्य रेखा, अन्तरचतुर्थक दायरा (IQR), र १.५ × IQR (n = ३) को लागि बक्सहरू देखाउँछन्।
म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको र उपचार नगरिएको परागकणमा खुवाइएका लार्भाका सूक्ष्मजीव समुदायहरूको संरचना। (क) लार्भामा सूक्ष्मजीव जेनेराको सापेक्षिक प्रशस्तता पढिन्छ। (ख) पहिचान गरिएका सूक्ष्मजीव समुदायहरूको ताप नक्सा। डेल्फिया (विषम अनुपात (OR) = ०.६७, P = ०.००३०) र स्यूडोमोनास (OR = ०.३, P = ०.००७४), माइक्रोब्याक्टेरियम (OR = ०.७५, P = ०.०६१७) (OR = १.५, P = ०.००६०); सहसम्बन्ध दूरी र औसत जडान प्रयोग गरेर ताप नक्सा पङ्क्तिहरू क्लस्टर गरिएका छन्।
हाम्रो नतिजाले फूल फुल्ने समयमा व्यापक रूपमा प्रयोग गरिने सम्पर्क (म्यानकोजेब) र प्रणालीगत (पाइरोस्ट्रोबिन र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिन) फङ्गिसाइडहरूको मौखिक सम्पर्कले मकैको लार्भाको तौल वृद्धि र मृत्युदरमा उल्लेखनीय रूपमा कमी ल्याएको देखाएको छ। यसको अतिरिक्त, म्यानकोजेबले प्रिपुपल चरणको समयमा माइक्रोबायोमको विविधता र समृद्धिलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गर्‍यो। अर्को प्रणालीगत फङ्गिसाइड, माइक्लोबुटानिलले तीनै खुराकहरूमा लार्भाको शरीरको तौल वृद्धिलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गर्‍यो। यो प्रभाव दोस्रो (दिन ५) र तेस्रो (दिन ८) समय बिन्दुहरूमा स्पष्ट थियो। यसको विपरित, साइप्रोडिनिल र क्याप्टानले नियन्त्रण समूहको तुलनामा तौल वृद्धि वा बाँच्नको लागि उल्लेखनीय रूपमा कम गरेनन्। हाम्रो ज्ञानमा, यो काम प्रत्यक्ष परागकण एक्सपोजर मार्फत मकै बालीलाई जोगाउन प्रयोग गरिने विभिन्न फङ्गिसाइडहरूको क्षेत्र दरहरूको प्रभाव निर्धारण गर्ने पहिलो काम हो।
नियन्त्रण उपचारको तुलनामा सबै फङ्गिसाइड उपचारहरूले शरीरको तौल वृद्धिलाई उल्लेखनीय रूपमा घटाए। म्यान्कोजेबले लार्भाको शरीरको तौल वृद्धिमा सबैभन्दा ठूलो प्रभाव पारेको थियो जसमा औसतमा ५१% को कमी आएको थियो, त्यसपछि पाइरिथियोस्ट्रोबिन आयो। यद्यपि, अन्य अध्ययनहरूले लार्भा चरणहरूमा फङ्गिसाइडको क्षेत्रीय खुराकको प्रतिकूल प्रभावहरू रिपोर्ट गरेका छैनन् ४४। यद्यपि डायथियोकार्बामेट बायोसाइडहरूमा कम तीव्र विषाक्तता देखाइएको छ ४५, इथिलीन बिस्डिथियोकार्बामेट्स (EBDCS) जस्तै म्यान्कोजेबले युरिया इथिलीन सल्फाइडमा पतन गर्न सक्छ। अन्य जनावरहरूमा यसको म्युटेजेनिक प्रभावहरूलाई ध्यानमा राख्दै, यो डिग्रेडेसन उत्पादन अवलोकन गरिएका प्रभावहरूको लागि जिम्मेवार हुन सक्छ ४६,४७। अघिल्ला अध्ययनहरूले देखाएका छन् कि इथिलीन थायोरियाको गठन उच्च तापक्रम ४८, आर्द्रता स्तर ४९ र उत्पादन भण्डारणको लम्बाइ ५० जस्ता कारकहरूद्वारा प्रभावित हुन्छ। बायोसाइडहरूको लागि उचित भण्डारण अवस्थाले यी साइड इफेक्टहरूलाई कम गर्न सक्छ। थप रूपमा, युरोपेली खाद्य सुरक्षा प्राधिकरणले पाइरिथियोपाइडको विषाक्तताको बारेमा चिन्ता व्यक्त गरेको छ, जुन अन्य जनावरहरूको पाचन प्रणालीको लागि क्यान्सरजनक देखाइएको छ ५१।
मकै बोरर लार्भाको मृत्युदर बढाउँछ। यसको विपरीत, माइक्लोबुटानिल, सिप्रोसाइक्लिन र क्याप्टनको मौखिक प्रशासनले मृत्युदरमा कुनै प्रभाव पारेन। यी नतिजाहरू लाडर्नर एट अल.52 भन्दा फरक छन्, जसले क्याप्टनले वयस्क ओ. लिग्नारिया र एपिस मेलिफेरा एल. (हाइमेनोप्टेरा, एपिसिडे) को अस्तित्वलाई उल्लेखनीय रूपमा कम गरेको देखाएको छ। थप रूपमा, क्याप्टन र बोस्कालिड जस्ता फङ्गिसाइडहरूले लार्भा मृत्युदर52,53,54 वा खुवाउने व्यवहार55 परिवर्तन गर्ने पाइएको छ। यी परिवर्तनहरूले, बारीमा, परागकणको पोषण गुणस्तर र अन्ततः लार्भा चरणको ऊर्जा लाभलाई असर गर्न सक्छ। नियन्त्रण समूहमा अवलोकन गरिएको मृत्युदर अन्य अध्ययनहरू 56,57 सँग मिल्दोजुल्दो थियो।
हाम्रो काममा देखिएको पुरुष-अनुकूल लिङ्ग अनुपातलाई फूल फुल्ने समयमा अपर्याप्त संभोग र खराब मौसम अवस्था जस्ता कारकहरूद्वारा व्याख्या गर्न सकिन्छ, जुन पहिले भिसेन्स र बोशले ओ. कोर्नुटाको लागि सुझाव दिएका थिए। यद्यपि हाम्रो अध्ययनमा पोथी र भालेहरूको संभोगको लागि चार दिन थियो (सफल संभोगको लागि सामान्यतया पर्याप्त मानिने अवधि), हामीले तनाव कम गर्न जानाजानी प्रकाशको तीव्रता घटायौं। यद्यपि, यो परिमार्जनले अनजानमा संभोग प्रक्रियामा हस्तक्षेप गर्न सक्छ61। थप रूपमा, मौरीहरूले वर्षा र कम तापक्रम (<5°C) सहित धेरै दिन प्रतिकूल मौसमको अनुभव गर्छन्, जसले संभोग सफलतामा नकारात्मक असर पार्न सक्छ4,23।
हाम्रो अध्ययनले सम्पूर्ण लार्भा माइक्रोबायोममा केन्द्रित भएतापनि, हाम्रो नतिजाले मौरीको पोषण र फङ्गिसाइडको जोखिमको लागि महत्वपूर्ण हुन सक्ने ब्याक्टेरिया समुदायहरू बीचको सम्भावित सम्बन्धहरूमा अन्तर्दृष्टि प्रदान गर्दछ। उदाहरणका लागि, लार्भाले म्यानकोजेब-उपचार गरिएको परागकण खुवाएको थियो, लार्भाले उपचार नगरिएको परागकण खुवाएको तुलनामा माइक्रोबियल समुदाय संरचना र प्रशस्ततालाई उल्लेखनीय रूपमा कम गरेको थियो। उपचार नगरिएको परागकण उपभोग गर्ने लार्भामा, ब्याक्टेरिया समूह प्रोटियोब्याक्टेरिया र एक्टिनोब्याक्टेरिया प्रमुख थिए र मुख्यतया एरोबिक वा फ्याकल्टेटिभली एरोबिक थिए। डेल्फ्ट ब्याक्टेरिया, सामान्यतया एकान्त मौरी प्रजातिहरूसँग सम्बन्धित, एन्टिबायोटिक गतिविधि भएको जानिन्छ, जसले रोगजनकहरू विरुद्ध सम्भावित सुरक्षात्मक भूमिकालाई संकेत गर्दछ। अर्को ब्याक्टेरिया प्रजाति, स्यूडोमोनास, उपचार नगरिएको परागकण खुवाइएको लार्भामा प्रचुर मात्रामा थियो, तर म्यान्कोजेब-उपचार गरिएको लार्भामा उल्लेखनीय रूपमा कम भएको थियो। हाम्रो नतिजाले स्यूडोमोनासलाई O. bicornis35 र अन्य एकान्त wasps34 मा सबैभन्दा प्रचुर मात्रामा जेनेराको रूपमा पहिचान गर्ने अघिल्लो अध्ययनहरूलाई समर्थन गर्दछ। O. cornifrons को स्वास्थ्यमा Pseudomonas को भूमिकाको लागि प्रयोगात्मक प्रमाणहरूको अध्ययन गरिएको छैन, यो ब्याक्टेरियमले बीटल Paederus fuscipes मा सुरक्षात्मक विषाक्त पदार्थहरूको संश्लेषणलाई बढावा दिने र भिट्रो 35, 65 मा आर्जिनिन चयापचयलाई बढावा दिने देखाइएको छ। यी अवलोकनहरूले O. cornifrons लार्भाको विकासको समयमा भाइरल र ब्याक्टेरियाको प्रतिरक्षामा सम्भावित भूमिकाको सुझाव दिन्छ। माइक्रोब्याक्टेरियम हाम्रो अध्ययनमा पहिचान गरिएको अर्को जीनस हो जुन भोकमरी अवस्थाहरूमा कालो सिपाही फ्लाई लार्भामा उच्च संख्यामा उपस्थित भएको रिपोर्ट गरिएको छ66। ​​O. cornifrons लार्भामा, माइक्रोब्याक्टेरियाले तनाव अवस्थाहरूमा पेटको माइक्रोबायोमको सन्तुलन र लचिलोपनमा योगदान पुर्‍याउन सक्छ। थप रूपमा, रोडोकोकस O. cornifrons लार्भामा पाइन्छ र यसको डिटोक्सिफिकेशन क्षमताहरूको लागि परिचित छ67। यो जीनस A. florea को पेटमा पनि पाइन्छ, तर धेरै कम प्रचुरतामा68। हाम्रा नतिजाहरूले लार्भामा चयापचय प्रक्रियाहरू परिवर्तन गर्न सक्ने असंख्य माइक्रोबियल ट्याक्सामा धेरै आनुवंशिक भिन्नताहरूको उपस्थिति प्रदर्शन गर्दछ। यद्यपि, O. cornifrons को कार्यात्मक विविधताको बारेमा राम्रोसँग बुझाइ आवश्यक छ।
संक्षेपमा, नतिजाहरूले संकेत गर्दछ कि म्यान्कोजेब, पाइरिथियोस्ट्रोबिन र ट्राइफ्लोक्सिस्ट्रोबिनले शरीरको तौल वृद्धि र मकै बोरर लार्भाको मृत्युदर बढायो। परागकणहरूमा फङ्गिसाइडको प्रभावको बारेमा बढ्दो चिन्ता भएतापनि, यी यौगिकहरूको अवशिष्ट मेटाबोलाइट्सको प्रभावलाई राम्रोसँग बुझ्न आवश्यक छ। यी नतिजाहरूलाई एकीकृत परागकण व्यवस्थापन कार्यक्रमहरूको लागि सिफारिसहरूमा समावेश गर्न सकिन्छ जसले किसानहरूलाई फलफूलको रूख फुल्नु अघि र समयमा फङ्गिसाइडहरू छनौट गरेर र प्रयोगको समय परिवर्तन गरेर, वा कम हानिकारक विकल्पहरूको प्रयोगलाई प्रोत्साहन गरेर केही फङ्गिसाइडहरूको प्रयोगबाट बच्न मद्दत गर्दछ। 36। यो जानकारी सिफारिसहरू विकास गर्न महत्त्वपूर्ण छ। कीटनाशक प्रयोगमा, जस्तै अवस्थित स्प्रे कार्यक्रमहरू समायोजन गर्ने र फङ्गिसाइडहरू छनौट गर्दा स्प्रे समय परिवर्तन गर्ने वा कम खतरनाक विकल्पहरूको प्रयोगलाई प्रवर्द्धन गर्ने। लिङ्ग अनुपात, खुवाउने व्यवहार, पेटको माइक्रोबायोम, र मकै बोररको तौल घटाउने र मृत्युदरमा अन्तर्निहित आणविक संयन्त्रहरूमा फङ्गिसाइडको प्रतिकूल प्रभावहरूमा थप अनुसन्धान आवश्यक छ।
चित्र १ र २ मा स्रोत डेटा १, २ र ३ लाई फिगशेयर डेटा भण्डार DOI मा जम्मा गरिएको छ: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 र https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233। हालको अध्ययनमा विश्लेषण गरिएका अनुक्रमहरू (चित्र ४, ५) NCBI SRA भण्डारमा एक्सेसन नम्बर PRJNA1023565 अन्तर्गत उपलब्ध छन्।
बोश, जे. र केम्प, WP कृषि बालीहरूको परागकणकर्ताको रूपमा मह मौरी प्रजातिहरूको विकास र स्थापना: ओस्मिया प्रजातिको उदाहरण। (हाइमेनोप्टेरा: मेगाचिलिडे) र फलफूलका रूखहरू। साँढे। एनटोमोर। स्रोत। ९२, ३–१६ (२००२)।
पार्कर, एमजी एट अल। न्यूयोर्क र पेन्सिलभेनियाका स्याउ उत्पादकहरूमाझ परागकण अभ्यास र वैकल्पिक परागकणकर्ताहरूको धारणा। अद्यावधिक। कृषि। खाद्य प्रणाली। ३५, १–१४ (२०२०)।
कोच आई., लोन्सडोर्फ ईडब्ल्यू, आर्ट्ज डीआर, पिट्स-सिंगर टीएल र रिकेट्स टीएच। स्थानीय मौरी प्रयोग गरेर बदाम परागणको पारिस्थितिकी र अर्थशास्त्र। जे. अर्थशास्त्र। एनटोमोर। १११, १६–२५ (२०१८)।
ली, ई., हे, वाई., र पार्क, वाई.-एल. ट्रागोपान फेनोलोजीमा जलवायु परिवर्तनको प्रभाव: जनसंख्या व्यवस्थापनको लागि प्रभाव। चढाई। परिवर्तन १५०, ३०५–३१७ (२०१८)।
Artz, DR र Pitts-Singer, TL दुई व्यवस्थित एकान्त मौरीहरू (Osmia lignaria र Megachile rotundata) को गुँड बनाउने व्यवहारमा फङ्गिसाइड र सहायक स्प्रेको प्रभाव। PloS One 10, e0135688 (2015)।
ब्यूवेस, एस. एट अल। कम-विषाक्त बाली फङ्गिसाइड (फेनबुकोनाजोल) ले पुरुष प्रजनन गुणस्तर संकेतहरूमा हस्तक्षेप गर्छ जसले गर्दा जंगली एकान्त मौरीहरूमा संभोग सफलता कम हुन्छ। जे. एप्स। पारिस्थितिकी। ५९, १५९६–१६०७ (२०२२)।
स्गोलास्ट्रा एफ. एट अल। नियोनिकोटिनोइड कीटनाशक र एर्गोस्टेरोल जैव संश्लेषणले तीन मौरी प्रजातिहरूमा सिनर्जिस्टिक फङ्गिसाइड मृत्युदरलाई दबाउँछ। कीट नियन्त्रण। विज्ञान। ७३, १२३६–१२४३ (२०१७)।
कुह्नेमान जेजी, गिलुङ जे, भ्यान डाइक एमटी, फोर्डिस आरएफ र ड्यानफोर्थ बीएन सोलिटरी बारुला लार्भाले परागकणद्वारा डाँठमा गुँड बनाउने मौरीहरूलाई आपूर्ति गरिएको ब्याक्टेरियाको विविधतालाई परिवर्तन गर्छन् ओस्मिया कोर्निफ्रन (मेगाचिलीडे)। अगाडि। सूक्ष्मजीव। १३, १०५७६२६ (२०२३)।
धरमपाल पीएस, डानफोर्थ बीएन र स्टेफन एसए किण्वित परागकणमा रहेका एक्टोसिम्बायोटिक सूक्ष्मजीवहरू एकान्त मौरीको विकासको लागि परागकण जत्तिकै महत्त्वपूर्ण छन्। पारिस्थितिकी। विकास। १२. e8788 (२०२२)।
केल्डेरर एम, मनिची एलएम, क्यापुटो एफ र थालहेमर एम। पुन: बीउ बिरुवा रोगहरू नियन्त्रण गर्न स्याउ बगैंचामा अन्तर-पङ्क्ति रोपण: सूक्ष्मजीव संकेतकहरूमा आधारित व्यावहारिक प्रभावकारिता अध्ययन। बिरुवा माटो ३५७, ३८१–३९३ (२०१२)।
मार्टिन पीएल, क्राभचिक टी., खोडादादी एफ., अचिमोभिच एसजी र पिटर केए मध्य-एट्लान्टिक संयुक्त राज्य अमेरिकामा स्याउको तीतो सड: कारक प्रजातिहरूको मूल्याङ्कन र क्षेत्रीय मौसम अवस्था र खेती संवेदनशीलताको प्रभाव। फाइटोपाथोलोजी १११, ९६६–९८१ (२०२१)।
कलेन एमजी, थम्पसन एलजे, क्यारोलन जेके, स्टाउट जेके। र स्टेनली डीए फङ्गिसाइड्स, झारनाशक र मौरी: अवस्थित अनुसन्धान र विधिहरूको व्यवस्थित समीक्षा। PLoS One 14, e0225743 (2019)।
पिलिंग, ईडी र जेप्सन, पीसी मह मौरीहरूमा ईबीआई फङ्गिसाइड र पाइरेथ्रोइड कीटनाशकहरूको सिनर्जिस्टिक प्रभावहरू (एपिस मेलिफेरा)। कीट विज्ञान। ३९, २९३–२९७ (१९९३)।
मुसेन, ईसी, लोपेज, जेई र पेङ, सीवाई। मह मौरीको लार्भा एपिस मेलिफेरा एल. (हाइमेनोप्टेरा: एपिडे) को वृद्धि र विकासमा चयन गरिएका फङ्गिसाइडहरूको प्रभाव। बुधबार। एनटोमोर। ३३, ११५१-११५४ (२००४)।
भ्यान डाइक, एम., मुलेन, ई., विक्स्टेड, डी., र म्याकआर्ट, एस. रूख बगैंचामा परागकणहरूलाई सुरक्षित राख्न कीटनाशक प्रयोगको लागि निर्णय गाइड (कर्नेल विश्वविद्यालय, २०१८)।
इवासाकी, जेएम र होगेन्डोर्न, के. मौरीहरूको गैर-कीटनाशकहरूमा एक्सपोजर: विधिहरू र रिपोर्ट गरिएका परिणामहरूको समीक्षा। कृषि। पारिस्थितिकी तंत्र। बुधबार। ३१४, १०७४२३ (२०२१)।
कोपिट एएम, क्लिन्जर ई, कोक्स-फोस्टर डीएल, रामिरेज आरए। र पिट्स-सिंगर टीएल ओस्मिया लिग्नारिया (हाइमेनोप्टेरा: मेगाचिलीडे) को लार्भा विकासमा आपूर्ति प्रकार र कीटनाशक एक्सपोजरको प्रभाव। बुधबार। एनटोमोर। ५१, २४०–२५१ (२०२२)।
कोपिट एएम र पिट्स-सिंगर टीएल एक्लै खाली गुँडमा रहेका मौरीहरूमा कीटनाशकको ​​सम्पर्कको मार्गहरू। बुधबार। एनटोमोर। ४७, ४९९–५१० (२०१८)।
पान, एनटी एट अल। वयस्क जापानी बगैंचा मौरी (ओस्मिया कोर्निफ्रन) मा कीटनाशक विषाक्तता मूल्याङ्कन गर्नको लागि एक नयाँ इन्जेसन बायोएसे प्रोटोकल। विज्ञान। रिपोर्टहरू १०, ९५१७ (२०२०)।